主题：【第六届原创】【许愿原创】某药片中维生素E的测定【dahua1981推荐】

某药片中维生素E的测定

摘要

    维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，又称生育酚，是抗氧化剂中最主要的一种。具有易溶于脂肪和乙醇等有机溶剂，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，但当油炸时维生素E活性明显降低等性质。能促进性激素分泌，使男子精子活跃和数量增加；使女子雌性激素浓度提升，提高生育能力，还可以预防流产。还具有防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容(滋润皮肤防止皮肤干裂)、预防近视发生和发展等功效。

实验部分

原理

    取适量药片研碎，准确称取，加入一定量的甲醇溶解，超声提取，过滤后注入高效液相色谱仪，经C18色谱柱洗脱，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量（外标法）计算。

仪器

高效液相色谱仪（包括柱温箱、自动进样器等）

超声波

溶剂过滤器

分析天平

研碎装置

试剂

甲醇：色谱纯

色谱条件
色谱柱：Venusil XBP C18(L)(4.6×250mm，5μm)

        S/N:V9520525CK0043

柱温：35℃

流动相：甲醇

检测波长：284nm

流速：1.2mL/min

进样体积：10μL

色谱图

维生素E对照品色谱图

某药片供试品色谱图

实验结果

    线性范围非常宽，在1μg/mL-500μg/mL相关系数r=0.9999；样品的加标回收率在98%-101%；6次进样结果定性重复性0.12%，定量重复性0.31%；理论塔板数为14580；最小检出限0.02μg/mL。

结论

    检测结果表明采用该方法测定某药片中维生素E的含量，结果准确、可靠，灵敏度、加标回收率高，线性范围宽。

    该方法适合测定该药片中维生素E的含量。

色谱条件是高效液相色谱法的主要因素，起着灵魂的作用，直接影响着检测效果。下面就主要介绍下优化色谱条件后带来的检测效果。

色谱条件优化说明

    检测首先要保证的是结果的准确性和可靠性，在此基础上如果能缩短检测时间，优化峰形，提高检测灵敏度，提高分离度那就更加完美了。

缩短检测时间一般有五种方式（前提是必须保证被测物与杂质的分离度，也就是主峰与干扰峰的完全分离）：

1.适当加大流速（这种方式一般不采用，因为特定的色谱柱在特定的流速下才有最佳的检测效果。有的色谱柱增加流速柱效会下降，系统压力也会增加，增加了不安全的因素，降低了检测效果；增加流速不要超过色谱柱允许的最大流速和最高压力）；

2.换为更短规格的色谱柱；

3.增加流动相中有机相的比列（反相色谱尤为明显，正向色谱一般正好相反）；

4.改变或增加流动相成分；

5.升高色谱柱温度。

提高灵敏度就是改变信噪比，具体有：

1.降低噪声；

a.通过净化流动相从而降低噪声；

b.选用背景更低的流动相；

c.系统控温；

d.减小系统死体积。

2.提高样品响应值（主要是增加色谱峰高）

a.选择最佳的检测波长；

b.通过改变流动相、控制流速、色谱柱温度，更换色谱柱、改变流动相的成分等方式使色谱峰宽变窄，从而变高；

c.采用梯度洗脱；

d.采用超高效液相色谱仪。

提高分离度的方式有：

1.可采用增加检测时间方式（与缩短检测时间方法相反）；

2.采样梯度洗脱方式；

3.改变流动相或更换更合适的色谱柱；

4.色谱柱控温；

5.减少进样量等；

6.降低样品浓度。

优化峰形：

1.缩短检测时间方法

2.提高灵敏度的方法；

3.减少进样量；

4.降低样品浓度；

5.减小进样器到检测器之间的死体积；

6.尽量减少进样器到检测器之间的连接接头；

7.还可以调节流动相的成分，如使用乙腈、水可以换为甲醇、水，或甲醇、乙腈、水等；

8.调节PH值或添加其它改善剂，如三氟乙酸等。

说明：

    优化色谱效果，方式很多，最终都是为了达到检测结果灵敏、准确、快速、方便等目的。有时改变一个条件同时可以达到几个结果，有的是都变好了，有的是完善了这个问题却带来了其它的问题。所以改变色谱条件前需明确目的，慎重考虑，尽可能获得最满意的结果。