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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】为什么毛细管电泳电流持续稳定降低？

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gabyg
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发表于：2014/05/11 18:42:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
      做Beckman毛细管电泳仪器校验，按照《JJG 964-2001 毛细管电泳仪检定规程》检定：

    波长254nm ，75μm × 40c m毛细管，柱温25℃，电泳电压为15 kV。选择气压8 kPa，进样时间3s(气压进样)。用20 mmol/L的磷酸氢二钠作为缓冲液，取质量浓度为2 X 10-6 g/ml的维生素B6溶液进样。

   



      校验用的毛细管有一年没用了，用之前活化了一下。电流图如上，电流持续降低，波动，然后又会陡然升至正常电流40μA。还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。

      后来买了新毛细管，结果还是这样。

      对毛细管还不太了解，请教大家这是怎么回事？
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2014/5/12 9:28:34 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？
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gabyg
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2014/5/12 10:55:41 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？


超声了。

还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。
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2014/5/12 10:57:32 Last edit by v2716616
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2014/5/12 13:10:44 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 gabyg(v2716616) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？


超声了。

还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。
那可能是毛细管出口端有细微断裂。可以检查一下。另外用碱多冲一冲。不过，如果是曾经用过让后又长时间放置的毛细管其实已经不适合再用了，换根新的吧。
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2014/5/15 11:00:28 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
换个新管可能就好了。溶液要过滤、超声。
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gabyg
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2014/5/18 20:54:45 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？


做另一个样时，基线一直往上飘，从头飘到尾，怎么回事啊？
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gabyg
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2014/5/18 20:59:23 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？


还有个很严重的问题，基线经常在零以下，紫外检测器。
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2014/5/18 22:00:29 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由v2716616发表：
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？


还有个很严重的问题，基线经常在零以下，紫外检测器。
灯用了多长时间？是不是快到寿命了呢？
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gabyg
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2014/5/20 20:26:22 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 gabyg(v2716616) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？


超声了。

还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。
那可能是毛细管出口端有细微断裂。可以检查一下。另外用碱多冲一冲。不过，如果是曾经用过让后又长时间放置的毛细管其实已经不适合再用了，换根新的吧。


已经换了新毛细管，问题还没有解决，电流还是这样，愁死我了。
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ericwong
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2014/5/21 9:55:34 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 gabyg(v2716616) 发表:
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原文由 nini2006(nini2006) 发表:
看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？


超声了。

还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。
那可能是毛细管出口端有细微断裂。可以检查一下。另外用碱多冲一冲。不过，如果是曾经用过让后又长时间放置的毛细管其实已经不适合再用了，换根新的吧。


已经换了新毛细管，问题还没有解决，电流还是这样，愁死我了。

新毛细管做了什么样的处理？
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beyond1977
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2014/5/22 11:05:48 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好再提供多点数据，比如第一针正常的图谱，还有你做样的程序，你说第一真好，第二针就不行了，会不会是你的冲洗程序有问题？
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