主题：【第八届原创】泽泻高效液相色谱法检测

泽泻高效液相色谱法检测

        药材泽泻为泽泻科植物泽泻的干燥块茎。与其它药材不同的是它是冬季茎叶开始枯萎时采挖，然后洗净，干燥，除去须根和粗皮，长的非常像土豆，这就是泽泻药材。

        该植物早期有人把它叫做泽芝、水泻、鹄泻、及泻等，多生长在沼泽边缘，故而得名。因它花较大，白色艳丽，花期较长，有人常在家中或庭院中作为花卉养殖观赏。
        全株有毒，地下块茎毒性较大。性寒，味微苦，可入药，具有利水、渗湿、泄热、化浊降脂、降低血清总胆固醇、减缓动脉粥样硬化形成等功效。主治肾炎水肿、肠炎泻痢、痰饮眩晕、遗精尿血、小便不利、高脂血症、脂肪肝及糖尿病等病症。
        下面我们用高效液相色谱法检测泽泻中主要药物成分23-乙酰泽泻醇B含量。
【实验部分】
【原理】
        精密称取适量泽泻样品经乙腈溶解，超声提取后注入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法（保留时间定性，峰面积定量）计算，得出泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量。
【仪器及试剂】
        仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+高压泵+柱温箱等），超声波清洗仪，溶剂过滤器，电子天平（0.001），五号筛（药典筛）等。
        试剂：乙腈（色谱纯），超纯水等。
【样品溶液制备】
        对照品溶液制备：精密称取23-乙酰泽泻醇B对照品1mg于50ml容量瓶中，加乙腈溶解定容，制成20μg/ml 23-乙酰泽泻醇B对照品溶液，备用。
        供试品溶液制备：取样品泽泻适量，充分粉碎后过药典筛五号筛，精密称取过筛粉末0.5g置于具塞锥形瓶中，精密加入乙腈25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟后，放冷，再次称定重量，用乙腈补足减少的重量，摇匀，0.45μm有机相微膜滤过，待测。
【色谱条件】
检测器：紫外检测器
检测波长：208nm
色谱柱：Promosil C18 ( 250 mm X 4.6mm，5μm )
流动相：乙腈：水=73：27（V：V)
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
进样量：10μl
【色谱图】
对照品溶液色谱图：

供试品溶液色谱图：


【计算】
样品中被测物含量计算公式：

D----供试品中被测物百分含量，以（%）表示
V----供试品稀释的总体积，单位（mL）
P3----供试品中被测物峰面积值
P4-----对照品中被测物峰面积值
ρ2----对照品被测物浓度。单位为mg/ml
M2----样品质量，单位（mg）

【结果】

        通过以上公式计算，泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量近似为0.058%，高于药典要求的不小于0.05%，该泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量符合药典要求，该检测项目合格。
【结论】
        以上方法检测泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量，虽然样品中干扰物较多，一定程度上影响了供试品色谱图的效果，对实验结果有微弱的影响（可能和实验室温度、风度等因素有关，由于实验室条件有限，没做该方面验证），但总体来说该方法较方便、快捷，结果准确、可靠，操作简单、易行，该方法适合该类样品检测。