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手性异构体的物理和化学性质极为相似,而其光学活性、生物活性和毒性等通常存在较大差异。依据其光学活性的差异,目前主要开发了
旋光检测器 (OR) 和
圆二色检测器 (ECD),可应用在手性异构体的检测中。这两类检测器可与HPLC直接连接使用,或串联在紫外或示差检测器之后。
以下简单介绍通用型旋光检测器的检测特征和应用范围:
(一)旋光检测器(OR)原理 旋光检测器主要是利用左、右圆偏振光在被测物介质中折射率差异的原理而设计。
如图1所示,旋光检测器主要由四大部分组成:光源(L)、光调节器(P、F)、样品检测池(C)、检偏器(A)和光电信号处理器(D)。待测液体经过样品检测池(C)时,对光源发出的平面偏振光产生旋光偏振作用,被后端的检偏器(A)收集,最后将偏振光强和偏振角度转换成电压等信号(D),从而达到识别手性异构体的目的。
在旋光检测器检测中,色谱峰呈现正峰(+)或负峰(-),通常对应手性化合物的右旋体和左旋体,如图2所示。
(二)旋光检测器 (OR) 的定性应用
1、区分手性异构体和非手性化合物
2、判断手性异构体的类型和洗脱顺序
3、定量研究: 在一定的浓度范围内,旋光检测器可达到较好的线性和灵敏度。对不同结构类型的手性异构体,其灵敏度、线性范围皆有所不同。相比其他检测器而言,OR检测器灵敏度相对较差且应用范围较窄,较少用于化合物的含量测定,如章伟光教授课题组和B. Toussaint课题组就曾考察过OR检测器和UV、RI和ELSD检测器的灵敏度。
总的来说,旋光检测器因易受流动相、温度等因素影响,主要应用在手性对映体的检测、识别及色谱制备,较少用于定量检测。