多肽合成是一个固相合成顺序顺序一般从C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为
液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典
液相合成法无法比拟的优点,从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种:固相合成和
液相多肽合成。【详情请咨询合肥国肽生物】
多肽合成技术
Merrifield首次提出了固相多肽合成方法(SPPS)以来,此技术的优势受大众青睐,所以目前大众比较长使用的多肽合成技术手段就是固相合成技术。固相合成肽技术是
液相合成肽技术的升华。
液相合成技术,也可进行多肽的合成,通常此方法会导致消旋的副反应,或在强碱存在时形成5(4H)-oxaylones和N-acylurea而受到影响。庆幸地是,这些副反应能最小化,但是还不能完全消除。
固相多肽合成原理
1963年,Merrifield提出了固相多肽合成方法,由于其合成方便,迅速,成为多肽合成的首选方法,而且带来了多肽有机合成上的一次**,并成为了一支独立的学科——固相有机合成,固相合成的发明同时促进了肽合成的自动化。
例如,国肽生物多肽合成主要是采用Fmoc合成法。Fmoc合成法采用Fmoc为α-氨基的保护基,侧链保护采用苄醇类。合成时将一个Fmoc-氨基酸衍生物共价交联到树脂上,用碱脱除Fmoc,用三乙胺中和游离的氨基末端,然后通过DCC活化、偶联下一个氨基酸,脱保护多采用HF法或TFMSA(三氟甲磺酸)法。
多肽合成服务种类
多肽合成服务通常有线性肽合成服务、多种难肽合成服务、修饰肽合成服务、以及部分多肽合成公司还会提供多肽定制服务,定制出有针对性的合成肽。
目前有多肽合成公司提供的线性肽合成可达100个氨基酸,在修饰肽合成上,能提供常见修饰,磷酸化(Ser/Thr/Tyr),环化(酰胺环/二硫键环),荧光标记(5(6)-FAM,FITC,CY5,RhodamineB,PNA,EDNAS/dabcyl等),生物素标记(Biotin,Lys(Biotin))/复合抗原(MAP)/含D型氨基酸,及各种氨基酸衍生物均可合成。
多肽产物纯度选择
常见的质谱级多肽纯度,一般要求>95%
用于抗体筛选纯度,一般>85%即可
NMR和结晶试验中,纯度一般>98%
粗品肽,一般>50%即可用于多肽筛选
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国肽生物主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。
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