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主题：【已应助】凝胶色谱柱流动性中加三氟乙酸

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sue
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发表于：2020/08/28 08:55:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新买的凝胶色谱柱，测试样品，和之前的旧柱子（型号一样的）相比，发现保留时间短的物质明显减少，而且样品分离不好。工程师说在流动相中加0.1%的三氟乙酸。

请问：

1.保留时间少的物质变少，是不是说大分子的物质都进入到柱子孔隙里面了？和低分子的物质重合一块了？

2.三氟乙酸能用在凝胶色谱柱上吗？
推荐答案：有水有渝回复于2020/08/29
与旧柱子是同一个品牌同一型号的色谱柱吗，检查一下流动相有没有配制错误，特别是pH、缓冲盐浓度、柱温等。只要孔径没有变化，大分子的物质不可能都进入到填料中小分子的内部
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轶辰
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2020/8/28 9:14:02 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
三氟乙酸可以改变样品和柱子的相互作用，达到改善峰形消除拖尾和展宽的作用。但没有试过用在凝胶色谱中
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hujiangtao
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2020/8/29 14:08:27 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做糠氨酸时用三氟乙酸峰型很好
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有水有渝
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2020/8/29 15:58:17 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
与旧柱子是同一个品牌同一型号的色谱柱吗，检查一下流动相有没有配制错误，特别是pH、缓冲盐浓度、柱温等。只要孔径没有变化，大分子的物质不可能都进入到填料中小分子的内部
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言逊
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2020/8/31 11:12:47 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
加完测下PH，凝胶柱子适用PH范围较窄。
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2020/9/4 22:05:09 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:与旧柱子是同一个品牌同一型号的色谱柱吗，检查一下流动相有没有配制错误，特别是pH、缓冲盐浓度、柱温等。只要孔径没有变化，大分子的物质不可能都进入到填料中小分子的内部
是同一厂家，同一型号。流动相是纯的THF，不存在pH和配错的问题
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dadgoh
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2020/9/5 6:13:23 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sue(Insp_33e46698) 发表:是同一厂家，同一型号。流动相是纯的THF，不存在pH和配错的问题
THF与原来是一个批号吗？，我们曾经发生过四氢呋喃试剂有问题的情况。建议测一下THF的PH，或用分子筛干燥并重蒸一下THF。
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