主题:【分享】【实战宝典】色谱柱粒径及孔径对保留时间有哪些影响?

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小官人
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问题描述:色谱柱填料的粒径及孔径大小除了可以增加柱效外,对保留时间有怎样的影响?在其他条件不变的情况下保留时间是延长还是缩短?

解答:
1)目前,高效液相色谱柱厂家色谱填料粒度从1μm到超过30μm均有销售,而目前分析用填料主要是3μm5μm等粒径。

2)填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,柱压越大,柱压的增加限制了粒度小于3μm的填料应用。在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3μm填料填充柱的柱效比相同条件下的5μm填料的柱效提高近30%;然而,3μm的色谱柱的背压却是5μm2倍。

3)柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱,即相同的塔板数或分离能力下,柱长更短,分析时间就可以缩短。

4)见图5-143种待测组分在3.5μm粒径填料色谱柱上分析时间明显比5μm时要短很多,但分离度基本不变,可大大提高工作效率。

5)可以采用低黏度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。

                                         


5-14 色谱柱粒径对组分保留时间的影响



1—马来酸;2—伪麻黄碱;3—二乙酰吗啡

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