实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8081421今日发帖：1 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【分享】C18的用法大全

浏览0 回复0 电梯直达
p3203140
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2024/09/04 13:12:29 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
                1、C18的特殊用法

  • 可用来除盐：一般的盐在C18上没有保留，而目标物有保留。
  • 可以用来净化血样或组织样中的脂肪等非极性组分。
  • 大极性样品难保留时，可选用亲水C18，并用纯水相洗脱，以延长驻留时间，甚至可以双柱串联。

  • 小极性样品难洗脱时，用乙腈搭配乙醇洗脱，或乙腈搭配二氯甲烷等洗脱。
  • 可用来富集或浓缩样品：对于水比例较高的稀溶液，可以将目标物富集吸附到C18上，然后再用高比例的有机相洗脱，达到浓缩的目的。                                                                                                                                                                                                                                                                                                                2、 C18使用注意事项                                                                                                                                                                                                        常规C18的使用，不能用纯水相洗脱，流动相中至少含有3%有机相，否则会发生C18键合相疏水塌陷，造成色谱柱没有保留能力。疏水塌陷后可用有机相再将疏水C18链展开。下面（a）图显示长链是舒展开的；（b）图显示为长链疏水塌陷。                                                                                                                                                                                                                                                                                                      图片参考文献【1】                                                                                                                                               
    • 在pH限定范围内使用，常规C18的pH耐受2-6，特殊键合的C18（杂化修饰）可耐受pH1-12，但还是不建议长时间保存在极端pH环境中。

    • 柱温一般不超过50℃，最高不超过60℃。

    • 水相使用超纯水或蒸馏水，有机相试剂使用色谱纯以上级别。

    • 缓冲盐流动相需过0.45μm滤膜后使用。

    • 用缓冲盐，有机相比例不能超过75%(具体看盐浓度和盐的溶解性)，完成实验后用高比例水相置换掉缓冲盐，再换高比例有机相冲洗色谱柱。

    • 为了延长C18柱的寿命，最好专柱专用，尤其是酸碱性条件不能频繁切换。

    • 方法开发时，尽量使用新色谱柱。

    • C18色谱柱冲洗：
    ①没有用缓冲盐，直接用甲醇或乙腈冲洗10个柱体积后保存；②用了缓冲盐，先用95%水甲醇冲洗10个柱体积，再用甲醇冲洗10个柱体积后保存；

    ③冲洗小极性杂质：完成上述①或者②后再用二氯甲烷冲洗10个柱体积，然后置换成甲醇或乙腈。（注：二氯甲烷与水不互溶，一定要用甲醇或乙腈过渡。）

    参考文献：[1] Przybyciel, M. & Majors, Ronald. (2002). Phase Collapse in Reversed-Phase LC. LC-GC Eur. 15. 15. 1-5.
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
手机版： C18的用法大全
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁