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主题：【已应助】液相色谱问题

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Insm_b759f1a
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发表于：2023/04/21 23:30:13 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天测试一个神经酰胺9的样品，用的液相，流动相都是一样的，发现用PDA测出来的纯度只有50多，用ELSD测出来的纯度却有90多，想不明白为啥？不应该ELSD的纯度更低吗？请各位大神指点一下，非常感谢
推荐答案：通标小菜鸟回复于2023/04/24
首先楼主确认一下方法是否合适？选择的波长是否合适？随后楼主再重新配制样品复测一下，确认一下，确保仪器走样是OK的，仪器没有问题。PDA检测器可以检测有紫外吸收的物质，而ELSD蒸发光散射检测器可以检测没有紫外吸收的物质，灵敏度也比PDA低。如果复测过后还是同样的情况，我猜测楼主做PDA时应该有很多impurities，这些杂质都有一定的紫外吸收，所以主成分的purity就很低。而用ELSD测时，灵敏度低，很多杂质都扫不出来，因而导致主成分峰面积百分比占比高，最终纯度就高。这些也都只是我的猜测，楼主还需要反复测试，进一步对比确认。
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2023/4/24 12:52:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先楼主确认一下方法是否合适？选择的波长是否合适？随后楼主再重新配制样品复测一下，确认一下，确保仪器走样是OK的，仪器没有问题。PDA检测器可以检测有紫外吸收的物质，而ELSD蒸发光散射检测器可以检测没有紫外吸收的物质，灵敏度也比PDA低。如果复测过后还是同样的情况，我猜测楼主做PDA时应该有很多impurities，这些杂质都有一定的紫外吸收，所以主成分的purity就很低。而用ELSD测时，灵敏度低，很多杂质都扫不出来，因而导致主成分峰面积百分比占比高，最终纯度就高。这些也都只是我的猜测，楼主还需要反复测试，进一步对比确认。
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安平
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2023/4/24 14:09:36 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主详细说明具体的操作条件和定量方法为好。


elsd的响应是非线性的，需要注意一下。


是否进样浓度超出某检测器检测范围，是否定量方法不良，均需要考虑
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Insm_b759f1a
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2023/4/24 20:46:01 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 安平(byron1111) 发表:楼主详细说明具体的操作条件和定量方法为好。elsd的响应是非线性的，需要注意一下。是否进样浓度超出某检测器检测范围，是否定量方法不良，均需要考虑
就是用的面积归一法，前处理方式都是直接用甲醇溶的样品，然后上机测试，分别在PDA和ELSD测试，同样的进样量，然后纯度就相差很大
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