主题：【分享】显色剂（2）

二、苷类鉴定试剂

1、糖鉴定试剂

（1）－萘酚－硫酸试剂

检查还原糖。

①溶液I：10％—萘酚乙醇溶液。溶液Ⅱ：硫酸。取lml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I2～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液Ⅱ，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。

②15％—萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混匀后使用。喷洒于薄层板上，100℃烤3～6min，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色，所显颜色于室温可稳定2天～3天。

（2）斐林试剂

检查还原糖。‘

溶液I：6.93g结晶硫酸铜溶于l00ml水中。溶液Ⅱ：34.6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于l00ml水中。取lml样品热水提取液，加入4～5滴訚鞅配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液，在沸水浴中加热数分赜，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和甙，取lml样品水提液，加入lmll0％盐酸溶液，在沸水浴上加热l0min，过滤，再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。

（3）氨性硝酸银试剂

检查还原糖。

硝酸银1g，加水20ml溶解，小心滴加适量氨水，边加边搅拌，至开始产生的沉淀将近全部溶解为止，过滤。取lml样品的水溶液，加入lml试剂，混匀后，40℃微热数分赜，管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性反应。本试剂也可作为色谱显色剂，喷洒后于110〗萦热数分赜，显棕黑色斑点为阳性反应。还原性物质如醛类、邻二酚类等有干扰。

（4）茴香醛－硫酸试剂

检查糖类化合物。

硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中，需临用前配制。喷洒于薄层板上，105〗萦热至显示色斑，不同糖显不同颜色。

（5）苯胺－邻苯二甲酸试剂

检查糖类化合物。

苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。作色谱显色剂用。喷后105℃烤5min，显红棕色斑点。

（6）l3－二'羟基萘酚－磷酸试剂

检查酮糖、醛糖。

0.2％1，3--'二羟基萘酚乙醇溶液50ml于85％磷酸50ml混合均匀后使用。喷后105℃烤5min～10min，酮糖呈红色，醛糖显淡蓝色。

（7）苯胺－二苯胺－磷酸试剂

检查糖类化合物。

苯胺4ml、二苯胺4g及85％磷酸20ml溶于丙酮200ml中。喷洒于薄层板上，85〗萦热10min，不同糖显不同颜色。

（8）2，3，5－三苯基氯化四氮唑(T．T．C)试剂

检查还原糖。

溶液Ⅰ：4％T．T．C甲醇溶液。溶液Ⅱ：4％氢氧化钠溶液。临訚鞅将溶液Ⅰ和Ⅱ等体积混合。喷洒后，100〗萦热5～10min，显红色斑点为阳性反应(醛类无干扰)。

（9）三氯化铁－冰醋酸(K．K)试剂

检查－去氧糖，常用于强心甙。

溶液I：1％三氯化铁溶液0.5ml，加冰醋酸至l00ml。溶液Ⅱ：硫酸。取样品乙醇提取液lml，譂髟管中，水浴上蒸去乙醇，残渣用0.5ml溶液I溶解，沿试管壁缓缓加入溶液Ⅱlml，静置分层，上层渐显蓝色，下层显红色或棕色为阳性反应(其颜色随苷元羟基和双键的位置和个数不同而不同)。

（10）占吨氢醇试剂

检查－去氧糖(常用于强心甙)。

10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸中，再加入lml硫酸混合。取lml样品，加入试剂lml，置水浴上加热30min，显红色为阳性反应。

（11）Gregg-Gisvold试剂

检查2．6－去氧糖。

溶液I：10％三氯化铁溶液。溶液Ⅱ：1％盐酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含2．8ml盐酸)。0.5ml溶液I于100ml溶液Ⅱ混合。将样品的乙醇溶液点于滤纸片上，晾干后，喷洒上述混合试剂，110〗萦热5min，显蓝色为阳性反应。

（12）3，5－二氨基苯甲酸－磷酸试剂

检查2－去氧糖。

3，5－二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于80％磷酸25ml，加水稀释至60ml。喷洒后，100〗萦热15min，2－去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色荧光。

（13）对硝基苯胺－过碘酸试剂

检查去氧糖。

溶液I：饱和偏高碘酸溶液1份加水2份混匀。溶液Ⅱ：1％对硝基苯胺乙醇溶液4份于盐酸1份混合。先喷溶液I，放置10min，再喷溶液Ⅱ，去氧糖显黄色，紫外光下显强荧光，再喷5％氢氧化钠甲醇溶液，颜色转绿，乙二醇同样显色。