主题:【已应助】氨基柱测5009.8葡萄糖果糖这个方法变更,峰分离不开

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五个峰连着,分离度很低。流动相之前是按照国标的配置,后面查资料说增加有机相可能会好点。然后就把乙腈:水的比例增加到了85:15,然后分离度还是很低。又怀疑是柱效问题,恢复柱效之后也没有好转。请问老师们还有什么可以优化的地方吗
推荐答案:009回复于2024/04/18
反正我们以前用的氨基柱柱效特别容易不好,有的用一次就不行了,你可以换一个柱子试试,或者改变一下柱子规格。
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五个峰连着,分离度很低。流动相之前是按照国标的配置,后面查资料说增加有机相可能会好点。然后就把乙腈:水的比例增加到了85:15,然后分离度还是很低。又怀疑是柱效问题,恢复柱效之后也没有好转。请问老师们还有什么可以优化的地方吗?
答:楼主,对于反向色谱,流动相中有机相比例越高,出峰越快,在分离度不好的前提下,增加有机相只会适得其反。标准上用的是氨基柱,4.6 mm?250 mm,粒径5μm ,流动相初始比例为乙腈 水=70  30(体积比),理论上按照标准方法是能分开的,楼主的色谱柱柱效可能不太好。给楼主两个建议,第一,在现有柱子下优化流动相比例,降低初始有机相比例,采用梯度洗脱方法,第二,更换柱效更高的色谱柱,比如粒径3.5微米的。
009
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反正我们以前用的氨基柱柱效特别容易不好,有的用一次就不行了,你可以换一个柱子试试,或者改变一下柱子规格。
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我是做液相色谱耗材的,有需要您可以联系我,我给您推荐一个柱子,13325011950微
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