可见分光光度计的原理及722型光栅分光光度计的结构和使用方法 ——2007年6月25日
2007-06-25 17:07:38
用来测量和记录待测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。
一、原理
当一束单色光照射待测物质的溶液时,当某一定频率(或波长)的可见光所具有的能量(hf)恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应(即ΔE=E2-E1=hf)时,待测物将对该频率(波长)的可见光产生选择性的吸收。用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度(吸光度)。由于在一定条件下,吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比,即A=
KCL
所以,在测得吸光度 A后,可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。
二、结构
722型光栅分光光度计的结构
722 型光栅分光光度计,采用自准式色散系统和单光束结构,色散元件为衍射光栅,使用波长为330 一800 nm
数字显示读数还可以直接测定溶液的浓度。
1 数字显示器 2 吸光度调零旋钮 3 选择开关 4 吸光度调斜滤按钮
5浓度旋钮 6 光源室 7 电源开关 8 波长手轮 9 波长刻度板
10 试样架拉手 11 100%T旋钮 12 干燥器
图722 型分光光度计 略
三、使用方法
722 型光栅分光光度计的使用方法
(1)操作步骤
①在接通电源前,应对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固,接地线通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源。
②将灵敏度派或调至“1”档(放六倍率最小)。调彼长调节器至所需波长。
③开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于“T”,调节透光度“100%”旋钮,使数字显示“100.0”左右,预热20分钟。
④打开吸收地暗室盖(光门自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收地盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光度“100%”旋钮,使数字显示为“100.0”。
⑤如果显示不到“100”,则可适当增加电流放大器灵敏度档数,但应尽可能使用低档数,这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度后必须按④重新校正“0”和“100”。
⑥按④连续几次调整“00.0”和“100”后,将选择开关置于A,调节吸光度调零旋钮,使数字显示“.000”。然后将待测溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值A。
⑦浓度 C
的测量。选择开关由“A”旋至“C”,将标准溶液推入光路,调节浓度旋钮。使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值。将待测样品溶液推入光路,即可读出待测样品的浓度值。
⑧如果大幅度改变测试波长时,在调整“00.0”和“100”后稍等片刻(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“00.0”和“100”即可工作。
(2)注意事项
①使用前,使用者应该首先了解本仪器的结构和原理,以及各个旋或之功能。
②仪器接地要良好,否则显示数字不稳定。
③仪器左侧下角有一只干燥剂筒,应保持其干燥,发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用。
④当仪器停止工作时,切断电源,电源开关同时切断,并罩好仪器。