主题：【分享】51种农药残留测定标准方法

谢谢楼主的鼓励。
平常我们只是加了PSA，同时加C18，没有比较，但我同意上面版友的意见，确实有点画蛇添足，不过，还是需要数据来支持，所以工作还要进一步的深入。进样体积同时还涉及灵敏度的问题，所以考虑用氮吹，然后定为相同的体积，也应该是有一定道理，只是在和增加工作步骤的比较下，感觉麻烦了。加内标的时机，我倒觉得标准中更合理，因在提取时就加入的话，内标物也存在提取和净化的回收率，和标样中的内标物的量反而不一致了。

原文由 xyzwz123 发表:
然是内标法，应该与定容体积没关系。另外，关于标样溶液的浓度不太明白，按4.9项农药标准工作液，4.12项农药混合标准溶液，混合标准溶液浓度范围应该在0.5－2mg/L,0.1-0.4mg/L之间，为什么附录A中却列出的混合标准工作液在1－40mg/L呢？
方法平常我们也有时用到的，只是15g样用15mL来提取，对大多样品来说感到提取液量不够，所以有时用到2－3倍的体积来提取，最后再对提取液浓缩，浓缩过程中还是有些损失噢。谢谢提供分析保护剂，平时我们用基质匹配标样，挺麻烦的。
即使采用外标，同样体积的样本提取液和基体标准加同样体积的保护剂，总体积一样，根本对定量不影响，况且采用内标法．还用内标物加的步骤不对，按QuECHERS法应在加乙腈振摇之后加，而这国标中内标在最后加仅为了避免进样体积不准,没有完全发挥内标的作用，我们在加乙腈提取之前就加内标物，定量效果也很好!
还有保护剂的作用有限，应该还是采用基体标准好，因为基体不同对待测组分影响是不同的，若保护剂效果好的话，那不同的基体影响就一样了．另外加了保护剂增加质谱低质荷比的杂峰，会影响FULLSCAN的质谱匹配率

非常感谢大家的详细讨论，尤其是12345，青橄榄，pingguwu等朋友！
附录A中列出的混合标准工作液浓度1－40mg/L，应该是4.8中的农药标准储备溶液浓度，标准溶液浓度在附录E中。

关于内标的问题，个人认为，严格意义上的内标，应该具有以下几个方面的特点：一是内标物应该和待测物结构以及性质非常相似，最理想的就是待测物的同位素标记物；另外内标物的出峰时间与待测物越接近越理想；由于本方法农药种类较多，添加一个内标不可能对性质各异的所有农药都兼顾。试验初期也是在开始就加入的内标，经过几个月的试验表明对本实验效果不理想才放弃。
Lehotay之前加入内标是为了补偿平行之间液体转移的损失误差，而本方法是为了补偿进样体积不同而产生的误差（当然，如果你认为这个误差完全可以忽略，也可以省去该步骤）--同时也可以对进样瓶在托盘上放置时期溶剂挥发造成的严重损失进行补偿（因为有时候发现某些样品在放置几个小时后有三分之一的损失）。

至于c18净化效果的问题，这是一个仁者见仁的事情，如果你不是仅看这一篇文章的话应该会了解到。
再者，Lehotay对不同吸附材料的试验是对各种不同品种样品的混合基质净化前后的干重对比进行的试验；不同的样品混合起来会有很大的不确定性，实际做检测不会混合起来做的，这和每个单独的样品的净化应该是不同的；另外他做的是ODS与PSA以及其他的材料的对比，他并没有做ODS+PSA的净化效果。

还有保护剂的问题。谁都知道用每种样品的基质配标准是补偿基质效应的最理想方式，但如果你每天要处理几十甚至几百个样品的时候你就会知道这样做的可行性有多大了。保护剂的提出本人认为是一个折中的不得已的方法---对检测某些极性较大基质增强效应明显的化合物来说---它能起到类似基质起到的作用。
但一种方法的提出不是终结所有方法，而是促进更完善方法的出现。保护剂的加入有很多后遗症，在这里我首次提到，如果大家使用的话要注意一些，除了在m/z100左右以下有干扰（对GC\MS)以外，（当然在选择离子模式下基本没什么干扰），一段时间以后对色谱柱的性能有一定的影响，建议在柱子前端加入一段较长的相同类型的旧柱子作为Guard column，当性能有下降时，前端截去一截；另外保护剂对最前出峰的化合物的RT有一点影响，是否具有普遍性还需要大家验证啊。

再者，Lehotay对不同吸附材料的试验是对各种不同品种样品的混合基质净化前后的干重对比进行的试验；不同的样品混合起来会有很大的不确定性，实际做检测不会混合起来做的，这和每个单独的样品的净化应该是不同的；另外他做的是ODS与PSA以及其他的材料的对比，他并没有做ODS+PSA的净化效果。


Lehotay 在2002年关于QuECHERS方法的幻灯片就比较了多种SPE填料的净化效果，其中就有ODS+PSA,请见附件
ODS+PSA
还有Lehotay曾在2004年详细地研究了QuECHERS法测定低脂肪食品中农药残留情况请见附件,加入C18会降低脂溶性农药的回收率
低脂肪食品_QuECHERS.doc

还有Lehotay曾在2004年详细地研究了QuECHERS法测定低脂肪食品中农药残留情况请见附件,加入C18会降低脂溶性农药的回收率
低脂肪食品_QuECHERS.doc
红字部分不对,应刻是加入C18之后,随着样品中脂肪含量增加极性小的农药的回收率降低,不过从附件1可见,C18+PSA的净化效果与单独PSA相当.

建议看一下这篇文章
Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, and Safe Approach
for Determining Pesticide Residues
Steven J. Lehotay
Summary
This chapter describes a simple, fast, and inexpensive method for the determination
of pesticides in foods and potentially other matrices. The method, known as the quick,
easy, cheap, effective, rugged, and safe (QuEChERS) method for pesticide residues involves
the extraction of the sample with acetonitrile (MeCN) containing 1% acetic acid
(HAc) and simultaneous liquid–liquid partitioning formed by adding anhydrous magnesium
sulfate (MgSO4) plus sodium acetate (NaAc), followed by a simple cleanup step
known as dispersive solid-phase extraction (dispersive-SPE). The QuEChERS method is
carried out by shaking a fluoroethylenepropylene (FEP) centrifuge tube that contains 1
mL 1% HAc in MeCN plus 0.4 g anhydrous MgSO4 and 0.1 g anhydrous NaAc per gram
wet sample. The tube is then centrifuged, and a portion of the extract is transferred to a
tube containing 50 mg primary secondary amine (PSA) and 50 mg C18 sorbents plus 150
mg anhydrous MgSO4 per milliliter extract (the dispersive-SPE cleanup step). Then, the
extract is centrifuged and transferred to autosampler vials for concurrent analysis by gas
chromatography–mass spectrometry (GC–MS) and liquid chromatography–tandem mass
spectrometry (LC–MS/MS). Different options in the protocol are possible depending on
alternate analytical instrumentation available, desired limit of quantitation (LOQ), scope
of targeted pesticides, and matrices tested.

这个标准我记得我已经上传过了，我们用这个标准做过果汁，没有做过蔬菜和水果，结果不错，而且很快。

这个方法非常好,不过此方法的定量限验证该怎样做啊,请大家帮忙指点一下,谢谢

想问一下这个和NY/T 761-2008 有什么关系吗？

原文由 mcds 发表:
想问一下这个和NY/T 761-2008 有什么关系吗？

没什么关系，是个全新的方法。比761快速，廉价。而且处理液可以直接上hplc，解决了好多问题。

NY/T 761-2008 也不错的