主题：【求助】给我看看这个审稿意见

原文由 mhq111111 发表:

原文由 zhouxiaoming 发表:
这句话真的是你上面说的意思吗？那我理解出入就大了．我理解的意思为：审稿人认为我的定标曲线（比如1-100μg/ml）是不是只测量了1-100μg/ml的范围，而对１μg/ml以下的范围和100μg/ml以上的范围没有测量，不知道是不是这样？

我觉得跟你的理解是一致的。编辑认为你应该画个图，他要看你线性的起点和终点。我想问一下，在做了标准曲线以后不是还要测定样品吗？你的样品的浓度是多少？在标准曲线的浓度范围内吗？

你说到点子上了,实际上,在我的文中,有两条标准曲线,一条就是上述的标准品的标准曲线,还有一条就是后来做了一系列浓度spiked的样品的曲线,这条曲线是依据上述标准品曲线的范围之内做的.回收率基本恒定,但是曲线的线性度稍差，其实审稿人在问我线性范围的定义的时候没有指明是哪一条，但是我更倾向于是标准品的曲线，因为我后来的样品曲线是依据上述范围做的．你认为是这样吗？

这么说，你采用的是标准加入法来确定样品浓度喽？
为什么不直接采用标准曲线法呢？怕基质对它有影响？
既然是标准加入法，我的想法是只要后面的一条加过样品的标准曲线就可以了。直接根据截距就可以推算出样品浓度了。我们以前在大学里学过的。
外推法。

原文由 mhq111111 发表:
这么说，你采用的是标准加入法来确定样品浓度喽？
为什么不直接采用标准曲线法呢？怕基质对它有影响？
既然是标准加入法，我的想法是只要后面的一条加过样品标准曲线就可以了。直接根据截距就可以推算出样品浓度了。我们以前在大学里学过的。
外推法。

我首先做了回收率实验，发现基本恒定，所以我就采用这种方法，至于基质，影响不大，因为我用过ＳＰＥ，最后出来的东西还是很干净的，而且最后样品提取后的溶剂与开始做标准样的时候一致．

另外，审稿人说要我做曲线图，你认为是两个图都要做呢还是只做标准品的就行了？

既然如此, 我觉得是否可以采用标准曲线法更简单一些。也就是说用你的第一条单纯的标准曲线就可以了，样品溶液直接配在溶剂里测定，不加标准溶液。
样品溶液的浓度大致是多少你心里有数吗？是否落在标准曲线的浓度范围内呢？主要是做限度检查还是定量测定呢？

其他不知道，不过色谱图标准曲线类还是用图标比较好，现在好的文章都是图文并茂的，一个小小图标直观，包含信息量大，要求严的杂志当然会这样要求

原文由 mhq111111 发表:
既然如此, 我觉得是否可以采用标准曲线法更简单一些。也就是说用你的第一条单纯的标准曲线就可以了，样品溶液直接配在溶剂里测定，不加标准溶液。
样品溶液的浓度大致是多少你心里有数吗？是否落在标准曲线的浓度范围内呢？主要是做限度检查还是定量测定呢？

呵呵，我发现我对你的意思理解有误，我做的实验其实并不是标准加入法．
我在这里简述一下我的课题的做法：我是做食品中抗生素残留的，用的是ＣＥ，我先用标准品做了一个低浓度下的线性（标准）曲线（也许更高浓度下仍然存在另一条线性，但对我没意义，所以就没做）．然后在实际的食品样品中（无抗生素）中添加抗生素，做ＳＰＥ提取，做回收率实验，得到回收率在高中低三个浓度基本恒定．然后再通过在食品中添加不同浓度的抗生素，做提取，以及检测实验，根据这些数据，再定义了一个线性范围，也就我说的实际样品检测的标准曲线图．我这样做的目的是用来做定量的．

原文由 happyjyl 发表:

原文由 zhouxiaoming 发表:
我觉得这样做也没有问题,但是如果要回答审稿人的问题,不可能去这样罗嗦的说吧,可是,有没有一种更标准的说法呢?

这我就不知道啦。我主要是翻译，对实验的了解还仅限于大学里学到的那些。你是哪个行业的？投的是哪个国家的杂志？对于怎么做实验、怎么定线性范围、怎么进行方法学验证之类的，一般都会有相应的guideline。建议你找找有关方面的指导原则，如果是英文原文的话我可以帮你看看。

我这个文章是做ＣＥ的，投的是一个好象是德国还是美国的杂志（TALANTA）．
我之前读过<Guidance for Industry> bioanalytical method validation,2001年版本的．里面关于标准曲线的定义是：
C. Calibration/Standard Curve
A calibration (standard) curve is the relationship between instrument response and known　concentrations of the analyte. A calibration curve should be generated for each analyte in thesample. A sufficient number of standards should be used to adequately define the relationship
between concentration and response. A calibration curve should be prepared in the same
biological matrix as the samples in the intended study by spiking the matrix with known　concentrations of the analyte. The number of standards used in constructing a calibration curve　will be a function of the anticipated range of analytical values and the nature of the　analyte/response relationship. Concentrations of standards should be chosen on the basis of the　concentration range expected in a particular study. A calibration curve should consist of a blank　sample (matrix sample processed without internal standard), a zero sample (matrix sample　processed with internal standard), and six to eight non-zero samples covering the expected
range, including LLOQ.

原文由 zhouxiaoming 发表:

呵呵，我发现我对你的意思理解有误，我做的实验其实并不是标准加入法．
我在这里简述一下我的课题的做法：我是做食品中抗生素残留的，用的是ＣＥ，我先用标准品做了一个低浓度下的线性（标准）曲线（也许更高浓度下仍然存在另一条线性，但对我没意义，所以就没做）．然后在实际的食品样品中（无抗生素）中添加抗生素，做ＳＰＥ提取，做回收率实验，得到回收率在高中低三个浓度基本恒定．然后再通过在食品中添加不同浓度的抗生素，做提取，以及检测实验，根据这些数据，再定义了一个线性范围，也就我说的实际样品检测的标准曲线图．我这样做的目的是用来做定量的．

我仔细看了你的做法，觉得就是标准加入法。请问你最后要测的是不是食品中的抗生素残留量？有些食品没有抗生素，那么就把它作为空白，或者说是没检出。虽然你的目的是定量，但是很可能存在没检出的情况，所以，建议报一个最低检出限。我做过药品有机溶剂残留，基本是一个意思。你能理解吗？

原文由 mhq111111 发表:

原文由 zhouxiaoming 发表:

呵呵，我发现我对你的意思理解有误，我做的实验其实并不是标准加入法．
我在这里简述一下我的课题的做法：我是做食品中抗生素残留的，用的是ＣＥ，我先用标准品做了一个低浓度下的线性（标准）曲线（也许更高浓度下仍然存在另一条线性，但对我没意义，所以就没做）．然后在实际的食品样品中（无抗生素）中添加抗生素，做ＳＰＥ提取，做回收率实验，得到回收率在高中低三个浓度基本恒定．然后再通过在食品中添加不同浓度的抗生素，做提取，以及检测实验，根据这些数据，再定义了一个线性范围，也就我说的实际样品检测的标准曲线图．我这样做的目的是用来做定量的．

我仔细看了你的做法，觉得就是标准加入法。请问你最后要测的是不是食品中的抗生素残留量？有些食品没有抗生素，那么就把它作为空白，或者说是没检出。虽然你的目的是定量，但是很可能存在没检出的情况，所以，建议报一个最低检出限。我做过药品有机溶剂残留，基本是一个意思。你能理解吗？

我实际上是做一种方法的发展,我找的是空白的食品样本(不含抗生素的),然后通过在空白样品里添加标准品,最后做提取,然后来检测.最后定标.

我认为，联系上下文，这里的roll over是指曲线偏转，是问你怎么定的检测上下限，是因为曲线在末端偏转了，还是根本上就没有做的范围外的样品！


   

原文由 happyjyl 发表:
   

原文由 zhouxiaoming 发表:
我不太懂这句话：Do the graphs roll over at either end or are these limits set because no solutions outside this range were investigated?

roll over是“翻转”的意思。联系到上文要你画出校准曲线这个要求，我觉得这里的roll over是指曲线的形状发生了改变。比如你在论文中提到校准曲线是y＝ax+b，线性范围是1ug/ml-100ug/ml，审稿的人就想问你：这个线性范围是怎么定出来的？是因为超出这个范围后校准曲线就不再是一根直线了，还是因为你根本就没有对这个浓度范围之外的溶液进行测定？（这里的solutions是指溶液）