紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】溶菌酶活力的测定?

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ahead35
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哦,一般都用动力学做,比较麻烦,你有参考标准方法吗\
ahead35
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大哥,我没有这方面的资料,不知大哥有标准测定资料不?谢谢!

原文由 zhouyuhu 发表:
哦,一般都用动力学做,比较麻烦,你有参考标准方法吗\
zam0825
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和这里联系一下
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lzx3000
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我在做酪氨酸酶活力的测定,文献中报道的方法如下:测定波长475nm的吸光值随时间增长直线,从直线斜率求得酶活力,消光系数按E=3700mol-1L.cm-1计算。
但是我不明白通过吸光值对时间的直线斜率怎么求得酶活力?还有为什么要指定消光系数?计算过程中有什么作用?
希望得到高人的指点阿
zam0825
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我在做酪氨酸酶活力的测定,文献中报道的方法如下:测定波长475nm的吸光值随时间增长直线,从直线斜率求得酶活力,消光系数按E=3700mol-1L.cm-1计算。
但是我不明白通过吸光值对时间的直线斜率怎么求得酶活力?还有为什么要指定消光系数?计算过程中有什么作用?
希望得到高人的指点阿

酶活力强的时候,吸光度随时间变化(升高)很快,当被抑制后,显著变慢直至停止变化,活性丧失。
qplongsan
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可以参考这个,国家卫生部标准http://www.newdruginfo.com/ypbz/hybb/r001.htm
pchduan
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血清中溶菌酶活力通过浊度比色法测定。反应底物为用磷酸缓冲溶液(0.05M、pH为6.1)配制的0.2mg/ml微壁溶球菌(Sigma)悬液。100µl血清与1900µl菌悬液混合,在530nm波长下,分别在0.5min和4.5min测定吸光值(OD)。活力单位定义为溶菌酶每min使含菌酶液吸光值减少0.001所需的能力。需对照标准曲线。溶菌酶标准品溶于磷酸缓冲溶液(0.05M、pH为6.1)中,配置成浓度为0U/ml、100 U/ml、200 U/ml、400 U/ml、600 U/ml、800 U/ml的标准溶液,室温下测得吸光值。仅供参考!
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血清中溶菌酶活力通过浊度比色法测定。反应底物为用磷酸缓冲溶液(0.05M、pH为6.1)配制的0.2mg/ml微壁溶球菌(Sigma)悬液。100µl血清与1900µl菌悬液混合,在530nm波长下,分别在0.5min和4.5min测定吸光值(OD)。活力单位定义为溶菌酶每min使含菌酶液吸光值减少0.001所需的能力。需对照标准曲线。溶菌酶标准品溶于磷酸缓冲溶液(0.05M、pH为6.1)中,配置成浓度为0U/ml、100 U/ml、200 U/ml、400 U/ml、600 U/ml、800 U/ml的标准溶液,室温下测得吸光值。仅供参考!

说的很对,不过我觉得单点好象也能做,不知道楼住试验了吗
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