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液相色谱（LC）

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主题：【求助】荧光素钠的HPLC检测

浏览0 回复6 电梯直达

ada825

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发表于：2008/05/26 11:32:45 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

悬赏金额：20积分状态：未解决

各位大侠，我想用HPLC测荧光素钠的浓度，但查到的文献都是用荧光检测器的，而我们的条件只有紫外检测器，各位有做过荧光素钠的吗，或是有没有什么解决办法。希望得到帮助，谢谢。

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2008/5/27 16:51:19 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

含量测定　　取本品约0.5g，精密称定，加水20ml溶解后，加稀盐酸5ml 使荧光素析出，用丁醇－氯仿(1:1) 提取4 次，每次20ml，合并提取液，用水10ml洗涤，洗液再用异丁醇－氯仿(1:1)5ml振摇提取，合并提取液，置105 ℃恒重的容器中，在水浴上通风蒸发至干，残渣用乙醇10ml溶解后，再置水浴上蒸干，并在105 ℃干燥至恒重，精密称定，残渣重量与1.132 相乘，即得供试量中含有C20H10Na2O5 的重量。

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雪妖

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2008/5/27 18:36:33 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果你真的要用UV的话你可以试着衍生一下，这个就需要查资料了
衍生物你用UV扫描一下看有没有吸收

做得怎么样，希望你和大家说说，分享一下。

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yhsun

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2008/5/27 22:17:06 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般来说，荧光的激发波长就是紫外的吸收波长，可以按此种方法试一试，除样品浓度，其他应该和荧光检测一致。

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雪妖

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2008/5/28 19:32:19 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 yhsun 发表:
一般来说，荧光的激发波长就是紫外的吸收波长，可以按此种方法试一试，除样品浓度，其他应该和荧光检测一致。

不知道有没有什么依据？

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ada825

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2008/6/14 18:42:32 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 czj_1027 发表:
如果你真的要用UV的话你可以试着衍生一下，这个就需要查资料了
衍生物你用UV扫描一下看有没有吸收

做得怎么样，希望你和大家说说，分享一下。

我找到的一个条件试了一下，发现峰形不错，也无干扰，请问UV检测器的HPLC法，和荧光分光光度法哪个更精确一些？（因为要投外文的），UV检测器的HPLC的峰形不错的话，为了发SCI用非得换成荧光检测器的HPLC么？

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阿du

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2008/6/15 0:23:47 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ada825 发表:
原文由 czj_1027 发表:
如果你真的要用UV的话你可以试着衍生一下，这个就需要查资料了
衍生物你用UV扫描一下看有没有吸收

做得怎么样，希望你和大家说说，分享一下。

我找到的一个条件试了一下，发现峰形不错，也无干扰，请问UV检测器的HPLC法，和荧光分光光度法哪个更精确一些？（因为要投外文的），UV检测器的HPLC的峰形不错的话，为了发SCI用非得换成荧光检测器的HPLC么？

在各自适合的领域里各有各的优点吧，对同一个样品，没有比较过。
不管什么方法，都需要进行方法的验证，只要验证的结果满意就可以了。没必要换检测器的。

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