主题：【分享】二氧化硫用甲醛缓冲溶液吸收方法测定中存在问题的答疑。

1\请问做二氧化硫用甲醛缓冲溶液吸收方法,在做标准曲线的时候吸取标准溶液取0.2\0.5\1\2\5\8\10ml时,你是用一个吸量管来取药吧?
是的。
2、不能用10ml的管吗?
可以。无论是那种，主要是操作熟练，掌握移液和放液的速度和要领。关键是放液时间的控制一样
3、哪种都可以?我怕5ml的吸两次误差大呀,哪一个好呢?
这就看你选择移液管的质量问题。关键是移液管要校正，或做对比试验

4、如果用5ml的管存在把5ml的溶液全部放出的.而且我发现有的吸量管最下口有一个标记,这个意思是溶液全放出后剩下的溶液在标记处吗?
是溶液全放出后剩下的溶液在标记处。我发现我取5ml的吸量管放液后有的溶液在标记下的,有的正好在标记处,不知道这样会不会影响到吸液的结果呢?
放液后有的溶液在标记下的,影响吸液的结果 。有的在标记处，有时不在，说明你的放液速度和停靠时间不稳定。
那如果把5ml的液体全部放出应该在标记处吗?
全部放出应该在标记处为正确。
有标记的，表示不能放完（吹出）。
我放到标记处的下面了,应该是液体放多了,是吗?
是的 。
5、加PRA要精确?
PRA应该要准确。PRA本身有颜色的。
6、还有加入二氧化硫标液的时候如果是用5ml的管加入0.5ml的标液,是不是先把5ml的管先吸满,然后放出0.5ml?
是的，这是重要的一点。多次吸液，使管壁外挂液带入，引起误差。
7、还有就是加入二氧化硫标液后,然后加入甲醛缓冲吸收溶液,每个管加好后就混匀,还是依次加完氨磺酸钠和氢氧化钠后,再一起摇匀呢?
二氧化硫标液后,然后加入甲醛缓冲吸收溶液,每个管加好后就混匀，依次加完氨磺酸钠和氢氧化钠后,再一起摇匀 。
8、显色时间,因为存在把A管倒入B管,然后比色,这样每个管有一个倒入的时间差,每个管如何保证比色时间相同呢?这个实验是不是要求比色时间很严格呢?比如20度水浴,是不是要求严格控制20分钟?过了20分钟会不会就要褪色呢?
尽量与比色时间一致。严格控制20分钟，过了20分钟就会要开始褪色。一般稳定20分钟后褪色很快

一般有比色皿4个。应统一编号。空白始终用一个。
剩下的3个比色皿三个要一起比。可提高比色速度。
9、剩下的三个比色皿,如果我装满水都测它们的吸光度,发现这三个比色皿的吸光度不完全一致呀,总是相差一点的,会不会影响到做标曲的吸光度值,而导致结果达不到三个九呢?
影响，应用洗液洗净。使之保持一样的透光值。误差超过0.001应淘汰或取校正值。

10、氨磺酸和氨基磺酸是一种药吗?
不是。结构不同。
做二氧化硫应该用哪一个呢?
氨磺酸 。
11、在做的时候,二氧化硫标液是自己配制的还是买现成的标液呢?我自己配的二氧化硫标液,在标定的时候每次标定的不平行,这样我就感觉不能保证标液的准确的,我的滴定做的不好,也找不出原因,就是每一次都不太平行,总是相差一些的.
标定麻烦。不经济。买现成的可减少由于滴定技术不熟练引来的误差 。

12、我做空气中二氧化硫实际采样的时候值非常的低,经常低于检出限,有的时候实际采的样竟然低于是空白,是我的操作问题吗?而我实际做标样的机会不多,我只知道做过一次标样,我没有代进去,也不知道是什么原因呀.
因素较多，如同前面所说的问题。最好曲线和样一起做。注意吸管的干燥洁净。关键是取标液要准
13、我做的空白值高，也不稳定？
说明你的操作有问题。不能将吸收液在外暴露时间过长，受污染的剩液应倒掉！尽量控制吸收液的暴露时间，以免吸收空气中的二氧化硫。
14、我做的值要减去空白,然后减去的值再代入原来的曲线是吗?
是的，去掉飞点。

15、二氧化硫的比色管和比色皿每次都要用吗?用水洗可以吗?
先用水冲-乙醇擦拭+盐酸洗-纯水冲净，具体见方法里的要求
16、吸管我可以保证洁净,但是不能干燥呀,经常上面有水的.
有水可在烘箱里于105度烘干 。
17、PRA应该是买的液体试剂比较好用是吗?如果买的是固体,是不是需要自己来提纯?
是的！固体的相当难提纯。
18、、从吸管内放二氧化硫标液以及其它药的时候，吸管需要右手竖直持，左手拿起比色管，把吸管口斜靠紧贴比色管壁放药吗？
是的。

19、如果贴比色管壁，我就怕多种药都靠壁的时候，会污染吸管外壁，而再吸药的时候导致药品污染的。怎么做是规范的呢？
A、将个管依次加入标液。B、加吸收液定容10ml,加液时同时将管壁的标液冲下，操作时先不要靠管壁，待标液冲下后，在贴壁慢慢定容。
加液的顺序是标液--吸收液（轻轻摇匀)--氨磺酸钠液-氢氧化钠液(摇匀）。
注意摇匀时不要具塞。比色管尽量选肩台高的（是指刻度线与管口距离长的意思）且一致。

20、二氧化硫标液是在冰箱内存放的，在用的时候需要把二氧化硫的温度达到室温做比较好吗？甲醛缓冲吸收贮备也是在冰箱内存放的，用的时候也需要温度达到室温时比较好吗？
一定是的。 这是低温影响移液管吸量的准确度。
21、做二氧化硫的水用一次蒸馏水可以吧？在做其它项目，比如是需要特别的水的时候，比如某个项目需要二次蒸馏水，那么在配药的时候就需要二次蒸馏水配，还是只是做空白以及稀释标样的时候需要用二次蒸馏水，而配药的时候只用一次蒸馏水就可以了呢？因为做标曲以及做标样都是去掉空白的，虽然药品中可能含有的是一次蒸馏水，我在想因为空白加入的是同一的药，是否配药的水不用要求那么严格，与做空白以及稀释标样的水不一样，是不是可以呢？
不可以！必须用一样的水！
空白值过高，易影响低浓度点位的消光值的。
22、我的比色管内有水，并不是完全干燥的，这个影响大吗？
无影响！移液管里有水是不行的！！！

23、二氧化硫做标曲减去空白的(0,0)点代入方程吗?
必须带入！！！
24、做标曲的1微克每毫升的标液在冰箱内存放能用多久呢?书上说是临用现配,我配好后放在冰箱内,下次再用,可以吗?
在5℃可保存1个月。只要不受污染，可多次用的。建议在稀释后的使用液最好不要超过100ml，使用到3-5次最好弃之。也可分装使用。一定要封闭好。
对于装标液、吸收液的瓶子应在瓶口外套上纸（塑料袋）套，扎好保存。
25、今天的空白吸光度是0.032，前天做的空白值是0.038，相差0。006，是不是差的太多了呢？前天和今天的吸收液都是从贮备液中新配制的，差别这么大，可以吗？
可以，也很正常。因为影响空白值的因素很多，有正有负。
26、我配好的吸收液用容量瓶盖好盖在实验室内存放两天，还能用吗？
可以。贮备液可在冰箱保存10个月。使用液最好现用临配。
27、吸收液存放在白色的瓶子内可以吗？
可以。尽量避光保存。
28、我做了10ml的这个点,一共做了4个,减去空白后的吸光度为0.426\0.443\0.419\0.431,有的值相差竟然达到0.02啊，我做的太不平行了，这是怎么回事呢？我是用5ml的管取2次得到10ml这个值的。
1、放液操作不熟练。多练！
2、检查比色皿，在用蒸馏水做消光值实验是否一致！
3、试试再另取10ml移液管加液。以消除5ml的两次加液产生的误差。
29、有最近考核做的曲线实例看看？

最近盲样抽考做的曲线：
标 液：0 0.50 1.00 2.00 5.00 8.00 10.00 μg
吸光值：0 0.022 0.047 0.090 0.223 0.356 0.442（减空白值后）
空白值=0.045 y=0.0442x+0.001 γ=0.99997
实验条件：显色温度28℃。盲样和曲线同步。
盲样定容：取样10ml水定容至250ml。
盲样真值：0.275±0.014
带4个同样测定值：0.276，0.276，0.271，0.281.均在盲样真值0.275±0.014 控制范围内。
30、在加完二氧化硫和吸收液后要先摇一下是吗？然后加完氨磺酸钠和氢氧化钠也要摇一下？两个摇一下都不能具塞摇是吗？
是的！
31、我一直是具塞颠倒摇的，这样盖子上的确会有液体，但是如果不具塞，我怕摇不匀呀，因为二氧化硫标液是最先加的，它是放在最下面的，会不会有残留在最底端呢？要摇多久算是混匀了呢？
旋转摇，按平常的时间里。

32、取适量稀释到200ml?250ml?500ml?取哪一个体积配得的二氧化硫标液比较准呢？
根据你做曲线的熟练程度，习惯且好操作来配置。 500-1000好些。
33、临用时再用此吸收液稀释为每毫升含1微克的二氧化硫的标准使用液的时候，我是取10稀到100ml?还是取20稀到200?还是取25稀到250ml？还是取50ml稀到500ml?哪一个比较好呢？比较准确呢？
一般100-250ml都行。最好用大肚吸管。
34、我用的比色管的最高刻度线离盖子比较近，这样影响大吗？
尽量选择肩台高的，这是考虑A组加标液后便于摇匀问题。
35、我经常会把高低不一的比色管同用的，这样不可以是吗？
A组管尽量选用一致的。便于观察刻度和摇匀。
36、二氧化硫的（0，0）必须代入，那做化验的其它项目，也是用比色法的，做标准曲线的时候,（0，0）都要求代入吗？比如做氨氮、六价铬、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、挥发酚的时候，（0，0）都要代入吗？还是说每个项目代不代入都要分情况呢？
都要带入。除方法说明不可带入外！
36、在取完二氧化硫标液的时候,取甲醛吸收液到10ml的时候,这个甲醛吸收液是用吸管取的吗?还是说直接在比色管内定容到刻度线呢?还是用吸管加9.5\9\8\5\2ml呢?
如果说用吸管分别加入还是用吸管加9.5\9\8\5\2ml，当与比色管的刻度线相差很远。说明你在加标准液或甲醛吸收液的刻度液管有问题。在这时应重新选择吸管。
也可当加完标液后用吸收液直接定容到比色管刻度线。
37、如果是用吸管取甲醛吸收液的，我如果用10ml的管，这个吸管的刻度线是从下到上，最上面是10ml，我在取9.5ml的时候，是直接吸液到9.5ml刻度线，然后放液吗？在取9ml的时候，是直接取液到9ml刻度线，还是取满10ml，放液到1ml刻度线呢？
是取满10ml，放液到1ml刻度线。

我原想取9.5ml的时候，也是取满10ml后再放液到0.5ml的，但是10ml的管没有0.5ml刻度线的，这种时候怎么办呢？
用1ml的吸管呀！
38、吸管的刻度线有从上到下，也有从下到上的，对于5ml的吸管，取二氧化硫标液的时候，如果刻度线最上端是0刻度，那么我会先取满液，然后放液到相应的刻度线，但是如果最上端的刻度线是5ml，我在取二氧化硫标液的时候，也可以先取满液到5ml刻度线，然后放液到4.5ml刻度线放出0.5ml吗？
是的！
39、刻度线读数从上到下和从下到上，在取液的时候有什么规定吗？
没有。

40、一个问题就是水浴的温度，我们的实验室温度不太恒定，现在的温度有时是17度，有时是15度，有时是20度，在这几种情况下，我一般是在水浴锅内显色，控制水浴温度在20度内，水浴锅的温度调在20度，但是插上温度计显示在22度，水浴锅的温度准还是温度计的温度准呢？
以温度计的温度为准！
20度要严格控制吗？
应该是。
41、在室温17度的时候，我也控制水浴锅的温度在20度，可以吗？
干吗不控制在15度好呢呢！因为水浴的温度与室温不能超过3度。
42、在做真正样品的时候，室温又变为20度怎么办？
按20度时选择显色时间。
43、我可以做标曲的时候用15度水浴，做样的时候用20度水浴而代入15度水浴做出的标曲吗？
可以。
44、空白值高问题：
a、一般问题出在盐酸副玫瑰苯胺纯度上，最好买上海上海试剂厂已提纯好的对品红。b、其次注意下水（消光值应小于0.0041)、盐酸、磷酸的质量。c、比色皿应用乙醇（75%）加盐酸（1：3）及时浸泡。并用蒸馏水做空白检验，当消光值大于0.002说明比色皿已受污染。d、对于比色皿应编上号，固定一个作为实际空白专用。e、比色时应从低含量到高，不要用蒸馏水冲洗比色皿。
45、曲线斜率问题：
a、应加入0，0对应点。b、控制好显色速度和比色速度。c、注意应将加好各种试剂的标液管里的标液逐管迅速倒入加有PRA的试管里。
46、我最近也一直在做二氧化硫的标准曲线，斜率也是低了点，0.04133，相关系数才0.997，这两天温度都控制在20度，想请教一下，怎样把标准曲线做好，我用的是自己提纯的副玫瑰苯胺溶液，如果空白吸光度可以，是不是副玫瑰苯胺溶液没问题，20度，空白是0.031。
注意比色速度。控制各环境下显色温度与显色时间
各环境下显色温度与显色时间对照表：
显色温度℃： 10 15 20 25 30
显色时间min： 40 25 20 15 5
稳定时间min： 35 25 20 15 10
试剂空白A0：0.030 0.035 0.040 0.050 0.060
47、在测定过程中需要做校准曲线，共7个点
显色后，其中前面6个点都正常，相反浓度最高的第7个点却比前六个点的颜色
都浅，显色条件和试剂都是一样的。
两个方面的原因：
1、加样停留时间不够，或分2次加样。采取准确加样操作方法。
2、显色时间过长，引起褪色现象。严格控制显色时间和比色速度。

这对我们这些新人有很大的帮助哦 谢谢

要准备做这个了...好像看过去很难搞定啊

解答好详细啊，学习学习啊。

另：有时空白高，也要注意氢氧化钠试剂，最好用优级纯的。我们曾遇到过类似情况。

非常好的答疑,解决了我很多疑惑