LC一般用的都是紫外吸收检测器,基于待测物有紫外吸收,所以所用流动相最好在紫外可见波长没有什么吸收,这样基线才能比较低,不会掩盖待测物的信号。
所以检测波长要比流动相的截止波长长。所谓溶剂截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量。
一些常用溶剂的紫外截止波长。
甲醇205nm ,水187nm ,乙腈190nm, 四氢呋喃 212nm, 丙酮330nm, 二氯甲烷 233nm, 氯仿245nm, 苯210nm ,正几烷190nm 。
从上面可以看到丙酮的截至波长是330nm,做流动相会掩盖一些信号。洗针以后,进样时残留的丙酮会和样品一起进入柱子,在色谱图上产生干扰信号。
所以不能用丙酮做流动相或者说洗针皆因如上所述。
如果不用紫外检测器(或者你所用检测波长比330nm高),反相当然可以用丙酮 。我们实验室在做制备的时候,过反相柱子(玻璃和不锈钢柱),流动相一般都用丙酮和水,因为我们不用紫外检测器,丙酮相对经济而且能达到目的。
但是我们有一台制备
液相,配的是紫外检测器,如果需要看色谱图就不能用丙酮做流动相了,但是对比较成熟的分离条件,我们不用即时监测,就把紫外检测器甩出去,仍然可以用丙酮做流动相。