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液相色谱（LC）
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主题：【求助】峰变宽了怎么回事?

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xzx1982
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发表于：2008/07/05 15:38:49 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

大家好!这个星期三做液相色谱,进标样做出来的色谱图峰变矮了点,没当一回事.但星期五做的色谱图对比以前正常的图峰高矮了一半,峰变的很宽,这是怎么一回事?
  哪位同事碰到过这样的情况.
  我的色谱柱刚用几个月,应该绝对是好的.保护柱因为前段时间峰托尾也刚换过.其它的设定条件都没什么变化.我做液相色谱流量都是1.0ml/min .进样量是10ul.
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2008/7/5 19:39:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱效下降了吧
另外考虑溶样条件改变了吗
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有水有渝
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2008/7/5 21:14:02 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
取其它样品检测一下柱子，是否柱子损害，压力跟以前比有没有太大的变化，有明显变大可能是柱子筛板污染阻塞了；检查一下管路是否正常，压力变化大不大；看看流动相有没有问题，重新配制一下，若是缓冲液特别要注意是否要调PH，样品溶剂也要看一下。
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changesight
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2008/7/6 15:48:54 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你说柱子肯定没问题?可是你这种现象就是柱效下降了.拿柱子的评价报告来照着做一下柱效的评价,十有八九是柱效下降了.可能是操作不当造成柱子的损坏.
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xzx1982
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2008/7/6 17:33:56 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以前有根柱子做了满长的时间,那根的确是柱效下降了,做出来的峰很宽很难看,而且会有前延和托尾,歪的,不对称.而这个只是峰变宽了,做出来的色谱图也很对称.我想不太可能是柱子的问题,毕竟这柱子刚买来不久,要是柱子坏了.我真得哭死了.
    流动相我重新配制过,换了还是一样.
    那天做得时候压力确实比以前大.
    星期一上班得好好研究研究了.如果知道原因我会上来告诉大家.一起学习学习.
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fgx123
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2008/7/6 17:57:17 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、流动相组成变化
2、流动相流速太低
3、漏液（特别是在柱子和检测器之间）
4、检测器设定不正确   
5、柱外效应影响
从上面几个地方找找原因
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