风之彩回复于2008/07/07
要检测的峰尽量在有机相和水相的比例稳定时出峰,这样出峰时间的重现性较好;
最后有机相的比例不是越高越好,这个比例要摸索,只要你要的样品峰能满足你的要求即可,有机相比例相差越大,梯度要平衡的时间就长啦 ;
如果是低压混合,流速很慢,如做质谱时,尽量不要跑梯度,平衡时间比较长(除非你要侧很多成分,比如中药指纹图谱),如果非要跑,一定要尽量减小死体积。
nnsss回复于2008/07/08
1,梯度淋洗对于低压混合必须有脱气机,高压混合可不必有,但最好要有备压,
2,初始平衡时间尽量长点,第一针最好不要,每走完一针后的平衡时间一定一致,每针保证出干净的条件下时间要一致,(很重要)
3注意你的柱子耐水性如何,如果水相过高,很难做重现
4,注意你的波长,如果接近截止波长,请选用梯度级试剂,
5,尽量降低溶样的强度,这样会减少麻烦,
6,梯度选择时尽量几相之间相变化要小,越小越好
欢迎沟通,13132151300
sdzb1982回复于2008/07/08
1、管路及柱子做梯度前要彻底的冲洗干净,防止空白中过多鬼峰的出现。
2、溶剂最好都用色谱纯的,特别是最好用高纯水或双蒸水,防止梯度分析中基 线过大的漂移。
3、要注意水相中盐的浓度,防止在有机相提升过程中盐的析出。
4、梯度分析中有机相的陡度不要太大。
zishuijing229回复于2008/07/08
我们都是高压梯度,梯度洗脱得注意:
1.溶剂的互溶性,当有机溶剂和缓冲溶液混合时还可能析出盐的结晶体,特别是磷酸盐;
2.切底脱气,溶剂相混可能产生气泡
3.溶剂比例变化引起粘度变化而产生压力变化,注意压力限
4.每次梯度洗脱完要进行足够的平衡,使其恢复初始状态
5.因为几相溶剂的混合,很容易产生鬼峰,空白得多做几次,使两次的空白重合为止,我一般要做3次