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主题：【求助】waters液相色谱梯度洗脱时保留时间重现性不是很好，可能有哪些原因？

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cyqcau168
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发表于：2008/08/11 22:57:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
等度洗脱时还行，梯度洗脱时保留时间重复性不是很好，请大家分析一下可能有什么原因？
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2008/8/11 23:05:10 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cyqcau168 发表:
等度洗脱时还行，梯度洗脱时保留时间重复性不是很好，请大家分析一下可能有什么原因？


你的梯度洗脱的步骤是怎样的...是用..乙腈：水 嘛，比例是多少
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风之彩
juju11
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2008/8/12 8:08:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平衡的时间是否足够？
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懿切瀡緣
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2008/8/12 9:28:09 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不能把好好平衡平衡
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活到九十 学到一百
wangboxzzjs
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2008/8/12 9:50:19 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1.系统或色谱柱没有达到相对的稳定，多运行两次洗脱程序；
2.两次进样期间平衡的时间适当加长；
3.检查流动相、管路、泵头有无气泡，如有应排除，流动相尽量脱气完全；
4.检查泵流量是否稳定；
5.控制室温不要波动太大或使用柱温箱。
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SuDaToKo
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2008/8/12 13:31:09 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱子没有平衡好
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有水有渝
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2008/8/12 18:50:43 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
密封好装有流动相的试剂瓶防止有机相挥发,使用柱温箱,选一个柱效较好的色谱柱
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zhangbin920
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2008/8/20 11:54:16 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼上说的很对，如果 这样还没能解决问题，就要考虑是不是泵本身有问题了，梯度系统最重要的就是梯度精密度和准确度。如果这个没法保证，肯定会出现保留时间不稳的情况。
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