主题：【讨论】国家认监委开展乳制品三聚氰胺检验能力验证，欢迎讨论检验过程

参考译文



食安输发第1002003号



2008年10月2日


各检验检疫所所长公启：



医药食品局食品安全部监视安全课长



（公章省略）






关于食品中三聚氰胺的检测方法


目前，鉴于中国国内发生了牛奶混入三聚氰胺的事件，已经制定了食品中含有三聚氰胺的检测方法，如附件2-1诉述。敬请了解，并在今后的工作中通过该检测方法对食品进行检测。































附件2-1


日本三聚氰胺液相－串联质谱检测方法





1.检测对象
三聚氰胺
2.性能基准
此检测方法具有以下性能。在被检测对象食品中添加检测限浓度或2倍检测限浓度的三聚氰胺进行回收试验，根据所得结果进行评价。
原则上要符合以下条件：
（1）检测限
0.5mg/kg
（2）选择性
对不含有被检测对象的样品（空白样品）进行试验，确认没有干扰检测限的峰存在。若存在干扰峰，则其强度应低于检测限浓度峰面积（或峰高）的三分之一。
（3）回收率
70-120%（若使用内标，则内标的回收率要在40%以上）
（4）精确度
RSD＜10%（n≥5）
3.检测方法例示（供参考）



检测方法例示


1．检测对象
三聚氰胺
2．仪器
液相色谱-串联质谱仪
3．药品、试剂
除以下所示药品以外，使用“关于食品中残留农药、饲料添加剂和兽药成分的检测方法”（2005年1月24日食安发第0124001号。以下简称检测方法通知）中，附件第1章总则3所示药品。
乙腈：农残级
50%乙腈：将等量乙腈和水混合
氨水（25%）
5%氨化甲醇溶液：将氨水（25%）和甲醇以1比19的比例混合
0.1及1mol/L盐酸
醋酸铵
水
甲醇
乙二胺-N-硅胶小柱（500mg）
强酸性阳离子交换小柱（500mg）
0.2PTFE滤膜
三聚氰胺标准品（纯度为98%以上）
三聚氰胺内标准品*1 三聚氰胺-15N3或三聚氰胺-13C3・15N3
*1：可从林纯药或和光纯药公司购得
4．检测溶液的配制
（1）提取
取5g均质后的样品，加入0.5mL含有浓度为10ug/mL三聚氰胺内标的50%乙腈溶液及50%乙腈溶液25mL，混合均匀后，以每分钟3000转的速度离心5分钟，取上清液。
（2）精制
①在乙二胺-N-硅胶小柱（500mg）*1中依次注入5mL甲醇，5mL 50%乙腈，弃去流出液。注入5mL（1）中所得提取液，注入1mL 50%乙腈溶液，在所得混合溶液中，加入130uL 1mol/L盐酸。
*1：此处用的是VARIAN Bond Elut PSA 500mg色谱柱
②往强酸性阳离子交换小柱（500mg）*2中依次注入5mL甲醇，5mL水，弃去流出液。将①中所得溶液注入后，依次注入2mL 0.1mol/L盐酸、1mL甲醇，弃去流出液。然后5mL注入5%氨化甲醇溶液，将所得溶液减压干燥，在残留物中加入10mL 50%乙腈，超声波5分钟。取1mL所得溶液，加入1mL 50%乙腈，过0.2umPTFE滤膜。所得滤液为检测溶液。
*2：此处用的是VARIAN Bond Elut SCX 500mg色谱柱
5．测定条件
色谱柱：SeQuant ZIC-HILIC（内径2.1mm，长度100mm，粒径3.5um）
柱温：40℃
流动相：A：10nM醋酸铵，B：乙腈

A：15%（0-4分），60%（4-5分）
流速：0.2mL/min
保持时间：2.5分
进样量：5uL
离子化模式：ESI（+）
质谱参数*3：


检测对象

离子对
锥孔电压（V）
解离电压（V）

三聚氰胺
目标离子1
127/68
30
30

目标离子2
127/85

三聚氰胺内标
目标离子1
130/87
30
30

目标离子2
130/69


*4：此处质量分析仪用的是Waters Quattro Premier XE，三聚氰胺内标用的是三聚氰胺-15N3。

国标方法离心时间10分钟效果不好，我们改为20分钟后，效果好多了

really?
多少转？

原文由 jane4891 发表:
我们也参加了，不过我的问题比较复杂，我现在还没做出来，领导拿来的问题盲样，我居然做不出来，加标回收奇差，我就是按国标做的，有没有人能说说前处理过程和注意事项啊，请大家帮忙啊

国标方法是有人觉得有问题,有试过农业部的那方法效果还可以,国标第三法前处理结果好些.

我用液相方法做，我直接把标准品加到待进样的样品里面，居然没有目标峰！！！！！！！！！！！郁闷中！！！！标准品峰很不错啊，但是所有样品加标进去目标峰都没有，真是奇怪啊？有人遇到这种情况吗？