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主题：【求助】做缓冲盐的时候流动相最好用纯水过度?

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marxinfy
marxinfy
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2008/10/10 12:52:41 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用水相超过50%的甲醇或乙腈溶液过度应该就可以了
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〓猪哥哥〓
03yx2
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2008/10/10 20:01:44 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaoguodong 发表:
1、用90%水，10%甲醇或乙腈，1ml/min流速冲洗30-45min。
  2、用你所要用的缓冲盐的流动相平衡柱子，待基线平稳后进样。
  3、做完样品后，先用纯水1ml/min流速冲洗系统10min（卸下色谱柱接双通，或者是直接把Purge 阀打开都可以）再用90%水，10%甲醇或乙腈，1ml/min流速冲洗30min，用50%水，50%甲醇或乙腈，1ml/min流速冲洗60min，再用纯甲醇或纯乙腈将柱子饱和即可。

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1.用95%水，5%甲醇或乙腈（看你所用的流动相中是哪种而定），1ml/min流速冲洗30-45min。
2.用你所要用的缓冲盐的流动相平衡柱子，待基线平稳后进样。
3.做完样品后，用95%水，5%甲醇或乙腈，1ml/min流速冲洗30min，用50%水，50%甲醇或乙腈，1ml/min流速冲洗60min，再用纯甲醇或纯乙腈将柱子饱和即可。


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明白了.多谢分享
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happy王子矜
wangzijin
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2008/10/11 9:23:29 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用过缓冲盐后拿高比例的水相清洗和做缓冲盐前用高比例的水过度的道理是一样的啊。用过了洗，防止盐分析出，用前，柱子是在纯有机相或高比例有机相内保存，直接上也会在柱前端析出。


一般也不必用到90%或95%的水相，如果你使用条件初始比例是50%，你就使用50%或稍微高一点的比例就可以，这样换上缓冲盐后稳定的也快一点。前面过度的时间长短由你使用的缓冲盐浓度和比例决定，如果浓度很低（0.01mmol/L以下）二十分钟就差不多了。
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