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液相色谱（LC）

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主题：【求助】孔雀石绿荧光检测法过PRS小柱回收率低

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yhniu99

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发表于：2008/11/22 22:10:18 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

本人做孔雀石绿，用荧光检测法，过PRS小柱回收率很低。直接用标准上柱，回收率40%。再洗脱也洗不下来了，怎么回事？洗脱液是按照标准上做的。请高手指点。谢谢！我的邮箱：yhniu99@126.com

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2008/11/24 12:47:09 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

没有做过，过小柱回收率低是不是小柱产生吸附，或者物质产生变化，换种溶剂洗脱行不？

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北方海盗

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2008/11/24 13:28:28 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

小柱在流速很快的情况下，回收率当然很低，因为其保留性差。

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nnsss

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2008/11/24 15:56:01 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

注意洗脱速度与截取馏分的关系

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fishyuping

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2008/11/27 15:47:46 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

做过孔雀石绿，但是是采用紫外检测器做的，回收率还不错。
回收率低有很多原因，柱子本身的质量以及过柱子时流速的控制，流速不要过快，否则会对回收率有很大的影响。

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an9811

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2008/11/28 20:25:17 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我的建议是：
1.看看您的柱子是否需要活化等于处理步骤。
2.取1ml较高浓度的有色孔雀石绿标准溶液用乙腈稀释后，用您以前的方法上柱子，观察有色层(有色孔雀石绿层)在整个过程中,在柱子上的流动情况，以确定您具体的情况，例如：柱子不吸附、流速过快、洗脱过快或者未能洗脱下来等原因。然后，再根据具体情况来解决。
3.我做过孔雀石绿的实验，单就过柱子而言回收率应该在90%以上。如果还不行的话，建议购买大厂商的商品PRS柱。

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