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主题：【分享】MAR-FISH 技术及其在环境微生物群落与功能研究中的应用

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dong3626
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发表于：2009/03/12 20:30:54 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
荧光原位杂交和微观放射自显影集成技术
MAR-FISH(microautoradiography fluorescence in situ hybridization),即荧光原位杂交和微观放射自显影集成技术。

MAR-FISH 技术中涉及FISH 和MAR 两项技术。
FISH 的基本原理为：将寡核苷酸探针用荧光染料标记, 再使之与固定在载玻片上的微生物样品杂交, 将未杂交的荧光探针洗去后, 用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)或普通荧光显微镜进行观察。
微观放射自显影(MAR) 的基本原理为：通过将微生物样品与放射性示踪剂或者放射性标记的底物培养后,具有吸收这种底物的活性微生物就会将放射性化合
物吸收到体内。经过适当的样品处理后, 放射性标记的样品被放置在载玻片或盖玻片上, 并与放射性敏感的感光乳剂接触。在一定时间的培养过程中,来自放射性样品的发射信号与悬浮在感光乳剂中的溴化银晶体接触。根据标准照相步骤冲洗感光乳剂时, 就会在放射性结构上面显现出黑色银粒, 并可通过显微镜清晰观察到。
而MAR 和FISH 的结合, 可以成功的将微生物的功能与特定的种属联系起来。
同时获得复杂环境中特定微生物的种属和功能特性, 从而更好地了解特定微生物在环境中的作用, 更清楚地认识微生物群落结构及其与微环境的相互关系。

MAR-FISH 技术及其在环境微生物群落与功能研究中的应用
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MAR-FISH 技术及其在环境微生物群落与功能研究中的应用
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littlewing
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2009/3/13 10:17:44 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大致看了一下，不是很明白
最主要一点，要同时进行放射性标记和荧光标记岂不是很麻烦？但是联合使用有什么独到之处却说得很少。。。
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