主题:【讨论】讨论一下进行药物质谱条件优化的时候使用的流动相

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zhufangwei
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在建立药物残留方法的时候,我们都是要用标准品溶液首先优化药物的质谱条件的,那这个时候流动相是如何选择的,Thermo的操作规程是要求使用50%甲醇50%水作为带动流动相,将蠕动泵注入的标准溶液带入质谱内,但我想也不至于是硬性规定吧,也不知道是否有依据。我做试验药物响应还可以,也是运气好啊,可是其他人做的药物按照这样做响应却很低,即使浓度配的很高,但是怎么调正离子模式响应也达不到e7,那遇到这样的问题应该如何去解决呢,按照这样优化,系统的压力不能高于多少。我想是不能太高的,不然药物很难被带入,是不是有硬性规定呢。其他厂家进行质谱优化的时候是不是也用的三通呢,AB的好像不是的,直接用蠕动泵打进去的,那还有其他的呢,比如Agilent,Waters,岛津的等等。
有没有版友用过这些的,有什么体会,具体的操作是怎样的,能否详加列入。
推荐答案:风之彩回复于2009/04/27
优化质谱条件,一般先用蠕动泵优化,溶剂不一定,看样品的性质选择合适的溶剂。
然后接上柱子优化色谱条件,等流动相基本定下来后,再接上三通,继续优化参数,如源温和气的参数等。
质谱响应大小,和化合物的性质很有关系的。不一定浓度高了,就能达到e7。
至于系统压力,不过使用蠕动泵,好像看不到系统压力的吧,如果接三通,不接柱子,压力不会太高的,具体多少也不一定,这个和管路长短、内径、使用的流动相组成等很有关系。
补充答案:

ellery回复于2009/04/25

请教,你说的意思是用药物的标准品作为调谐液来用,进行质谱条件优化吗?

宁馨儿回复于2009/05/08



300uL/min应该是30uL/min还有点靠谱哦,一般负离子要求在e6,正离子要求在e7是规程上写的很清楚的啊。
恩,是30uL/mL

lrm回复于2009/05/12

300uL/min是指LC流速,针泵一般为10-20uL/min

happy_horse1126回复于2009/06/08

ABI的质谱也是推荐使用流动相做方法优化的,但实际操作中,我们往往不用。因为这样就把针泵中的样品稀释了。不过用三通即走流动相又走针泵是最贴近实验实际条件的,这种方法才是最实际的优化方式。只是我们实际做下来发现走不走流动相调谐出的结果都差不多,所以我们通常就不用三通走流动相了。至于流动相的比例,因为现在质谱流动相通常是要走梯度的,这样就中庸一下,选甲醇(或者乙腈):水=50%了。如果你是走等度的流动相,可以用你以后分析时的流动相做调谐。

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ellery
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请教,你说的意思是用药物的标准品作为调谐液来用,进行质谱条件优化吗?
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原文由 ellery 发表:
请教,你说的意思是用药物的标准品作为调谐液来用,进行质谱条件优化吗?


我说的意思是进行某个药物分析时,首先要做的就是优化其质谱条件,如何优化,如上所述,难道我没有说太清楚么,至于调谐不调谐,是否也相同,那是另外一回事,
风之彩
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优化质谱条件,一般先用蠕动泵优化,溶剂不一定,看样品的性质选择合适的溶剂。
然后接上柱子优化色谱条件,等流动相基本定下来后,再接上三通,继续优化参数,如源温和气的参数等。
质谱响应大小,和化合物的性质很有关系的。不一定浓度高了,就能达到e7。
至于系统压力,不过使用蠕动泵,好像看不到系统压力的吧,如果接三通,不接柱子,压力不会太高的,具体多少也不一定,这个和管路长短、内径、使用的流动相组成等很有关系。
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原文由 juju11 发表:
优化质谱条件,一般先用蠕动泵优化,溶剂不一定,看样品的性质选择合适的溶剂。
然后接上柱子优化色谱条件,等流动相基本定下来后,再接上三通,继续优化参数,如源温和气的参数等。
质谱响应大小,和化合物的性质很有关系的。不一定浓度高了,就能达到e7。
至于系统压力,不过使用蠕动泵,好像看不到系统压力的吧,如果接三通,不接柱子,压力不会太高的,具体多少也不一定,这个和管路长短、内径、使用的流动相组成等很有关系。


你说的是waters的三重四级杆吗?怎么和Thermo的TSQ差别这么大啊,那你能不能具体的给个waters的三重四级杆药物优化的操作规程啊。
lrm
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我们做药物方法开发的一般步骤是:首先配置1ug/mL或1PPM的50%MeOH/H2O溶液(若药物极性较小,可加大有机相的比例),结上三通,即连接LC和针泵,一般流速300uL/min,TSQ上一般母离子信号在e5-e6比较正常,达到e7说明此化合物信号比较高(只有在仪器校正时会要求母离子信号e7),然后待母离子信号稳定后,确定子离子,按步优化质谱参数(Tub lens,CE等);SRM,质谱参数确定后卸掉三通,连接LC,最后优化LC条件(一般进样20ng/mL左右的样品溶液)。
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原文由 lrm 发表:
我们做药物方法开发的一般步骤是:首先配置1ug/ml或1PPM的50%MeOH/H2O溶液(若药物极性较小,可加大有机相的比例),结上三通,即连接LC和针泵,一般流速300ul/min,TSQ上一般母离子信号在e5-e6比较正常,达到e7说明此化合物信号比较高(只有在仪器校正时会要求母离子信号e7),然后待母离子信号稳定后,确定子离子,按步优化质谱参数(Tublens,CE等);SRM,质谱参数确定后卸掉三通,连接LC,最后优化LC条件(一般进样20ng/ml左右的样品溶液)。


300uL/min应该是30uL/min还有点靠谱哦,一般负离子要求在e6,正离子要求在e7是规程上写的很清楚的啊。
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请教,你说的意思是用药物的标准品作为调谐液来用,进行质谱条件优化吗?


我说的意思是进行某个药物分析时,首先要做的就是优化其质谱条件,如何优化,如上所述,难道我没有说太清楚么,至于调谐不调谐,是否也相同,那是另外一回事,


我想zhu版主讲的跟该版友提的应该是一个意思,有些老师说的调谐就是指化合物质谱条件的优化。
dickwang2008
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使用的流动相的种类,这个没有一定得限制。这应该根据化合物的性质来确定,比如说化合物形成的是M+Na峰,那么你使用加酸的流动相可能就不太合适。
宁馨儿
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我们做药物方法开发的一般步骤是:首先配置1ug/mL或1PPM的50%MeOH/H2O溶液(若药物极性较小,可加大有机相的比例),结上三通,即连接LC和针泵,一般流速300uL/min,TSQ上一般母离子信号在e5-e6比较正常,达到e7说明此化合物信号比较高(只有在仪器校正时会要求母离子信号e7),然后待母离子信号稳定后,确定子离子,按步优化质谱参数(Tublens,CE等);SRM,质谱参数确定后卸掉三通,连接LC,最后优化LC条件(一般进样20ng/mL左右的样品溶液)。


300uL/min应该是30uL/min还有点靠谱哦,一般负离子要求在e6,正离子要求在e7是规程上写的很清楚的啊。

恩,是30uL/mL
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300uL/min是指LC流速,针泵一般为10-20uL/min
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