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液相色谱（LC）

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主题：【求助】[请问]为什么表面活性剂容易残留在柱子里

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jtdxzn

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发表于：2009/05/04 15:12:45 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我前段时间做了一个生物表面活性剂，一端是长碳链，一端是氨基酸残基，做完后，走空白，发现有很多吸收峰，用的是C18柱子。

如果是因为这个原因的，那么我通常的样品是小肽，是不是都很容易残留在柱子里呢？

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2009/5/4 22:57:19 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

在离子对色谱中是把离子对试剂加入到流动相中，离子对试剂既有一个疏水性的尾巴又有一个带电的功能团。疏水性的尾巴可以和C18固定相作用，分子中的离子性部分指向亲水性的流动相，样品和缓冲溶液分子以离子交换机理竞争带电荷的基团，保留值增加的程度取决于离子对试剂的疏水性和浓度。
离子对其实就像肥皂水，亲酯的碳链会和C18结合（相似相溶），所以你用离子对之后要分别用大量水和甲醇冲洗，有时需要冲几个小时。

该帖子作者被版主 wenshaowei-2008加 2积分， 2经验，加分理由：感谢解答

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村长

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2009/5/4 23:00:09 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

刚才忘说了，你做肽要选择孔径比较大的色谱柱，根据分子量选300或以上吧，这样效果比较好

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阿du

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2009/5/5 12:11:06 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

像一楼说的，需要选择合适的流动相来增强洗脱。

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fengxuemei

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2009/5/5 20:26:12 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ycsun2003 发表:
在离子对色谱中是把离子对试剂加入到流动相中，离子对试剂既有一个疏水性的尾巴又有一个带电的功能团。疏水性的尾巴可以和C18固定相作用，分子中的离子性部分指向亲水性的流动相，样品和缓冲溶液分子以离子交换机理竞争带电荷的基团，保留值增加的程度取决于离子对试剂的疏水性和浓度。
离子对其实就像肥皂水，亲酯的碳链会和C18结合（相似相溶），所以你用离子对之后要分别用大量水和甲醇冲洗，有时需要冲几个小时。

弱弱的问一下：离子对试剂和经常用的缓冲盐试剂是同一个概念吗？
能否详细介绍下？谢谢~~~

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2009/5/5 21:31:02 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一、什么是离子对试剂？
离子对试剂是由强亲水离子形成，反作用于样品分子的中性离子对。因此，可用于同时分离带电分子和非带电分子。
二、哪些色谱柱和流动相可选离子对试剂？
一般可适用所有色谱固定相，流动相至少含用乙腈的情况下）。当使用长链的离子对试剂时，如：十六烷基硫酸铵或十二烷基硫酸钠，色谱柱将选用反相色谱柱。

三、离子对试剂的适用浓度
短链离子对试剂：5×10-3m0l/L
长链离子对试剂：5×10-4m0l/L

离子对试剂的选择
离子对试剂的种类和浓度对分离效果都有较大和影响.离子对试剂种类的选择依赖于被分离样品的性质.被分离溶质是强酸或强碱,离子对试剂可以是强酸或强碱,弱碱或强酸,弱酸,如被分离的溶质是弱酸或弱碱,则选用的离子对试剂必须是强碱或强酸.对于溶质结构性质相差较大的混合样品,离子对试剂种类的选择并没有特殊要求.离子对试剂疏水性的差别可以通过调节离子对试剂浓度和有机溶剂浓度获得满意的分离效果.
离子对试剂用于高压液相离子对萃取的液相色谱法分离分析强极性有机酸和有机碱的好方法。广泛应用于生物化学，药物学，和石油化工等领域。
一、用于酸性化合物
1、四丁基氢氧化铵（10%水溶液）
2、四丁基溴化铵
3、十二烷基三甲基氯化铵
二、用于酸性化合物
1、戊烷磺酸钠
2、己烷磺酸钠
3、庚烷磺酸钠
4、辛烷磺酸钠
5、癸烷磺酸钠
离子对试剂是高效液相色谱专用试剂，主要分析测试有机碱类离子化合物，代替离子交换法，具有可靠的分离效果。也可用于分析多肽和蛋白质，是制备抗静电聚脂纤维的中间体.

转自食品论坛

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