主题：【求助】中药指纹图谱技术中的问题

原文由 bc8000 发表:
本人最近尝试进行中药植物图谱（hplc）技术的应用，遇到不少问题，请高手指点，
1、传统hplc定量方法注重的是突出待测组分，尽量消除干扰组分，而在指纹图谱中却要尽量全面反映药材的整体组分，那么，请问在药材供试品的制备时，是否有什么比较通用的制备（如萃取等）方法，使得药材组分能较全面反映出来（因为本人做出来的药材峰都较少）。
2、复杂组分药材进行梯度洗脱时，有机相的初始浓度如何确定？
3、线性梯度洗脱，部分组分出峰时间很短（10分钟之内），部分却在40分钟左右才出峰，中间几乎没有什么峰，怎么解决？

原文由 bc8000 发表:
本人最近尝试进行中药植物图谱（hplc）技术的应用，遇到不少问题，请高手指点，
1、传统hplc定量方法注重的是突出待测组分，尽量消除干扰组分，而在指纹图谱中却要尽量全面反映药材的整体组分，那么，请问在药材供试品的制备时，是否有什么比较通用的制备（如萃取等）方法，使得药材组分能较全面反映出来（因为本人做出来的药材峰都较少）。
2、复杂组分药材进行梯度洗脱时，有机相的初始浓度如何确定？
3、线性梯度洗脱，部分组分出峰时间很短（10分钟之内），部分却在40分钟左右才出峰，中间几乎没有什么峰，怎么解决？

原文由 qiaolee744 发表:

原文由 bc8000 发表:
本人最近尝试进行中药植物图谱（hplc）技术的应用，遇到不少问题，请高手指点，
1、传统hplc定量方法注重的是突出待测组分，尽量消除干扰组分，而在指纹图谱中却要尽量全面反映药材的整体组分，那么，请问在药材供试品的制备时，是否有什么比较通用的制备（如萃取等）方法，使得药材组分能较全面反映出来（因为本人做出来的药材峰都较少）。
2、复杂组分药材进行梯度洗脱时，有机相的初始浓度如何确定？
3、线性梯度洗脱，部分组分出峰时间很短（10分钟之内），部分却在40分钟左右才出峰，中间几乎没有什么峰，怎么解决？

据我的了解，总结一下
中药指纹图谱
1.反映药材中的一类或几类成分（最常见的是某一类成分，比如黄铜，皂苷，一般不会超过两类，）在药材中的分布（相对含量）
2.反映药材不同部位（比如地上，地下）成分的差异
3.反映药材不同生长时期某类成分含量的变化
4.反映不同批次药材差异（一般用作工厂内控）
先要明确你的目的，再根据这一类成分的性质提取，纯化

复杂组分药材进行梯度洗脱时，有机相的初始浓度如何确定？
你可以做梯度实验
有机相从5%-80%（0-10min），看看峰主要集中在哪，算出此时有机相的浓度，再调一调

3、线性梯度洗脱，部分组分出峰时间很短（10分钟之内），部分却在40分钟左右才出峰，中间几乎没有什么峰，怎么解决？

加大10-40分钟间的梯度
考虑出峰早的是不是你要的一类成分（有可能是极性很大的杂质）
祝你好运！

原文由 user007 发表:
弱弱地问句：如何从指纹图谱看中草药的质量差别和真伪鉴别？小弟看过一些资料，但是存在一些疑问，一直没整明白？

原文由 bc8000 发表:

原文由 user007 发表:
弱弱地问句：如何从指纹图谱看中草药的质量差别和真伪鉴别？小弟看过一些资料，但是存在一些疑问，一直没整明白？

通过做多批次（10批以上）药材的hplc色谱图谱，选择出其中的共有峰（即指纹图谱），产生一个标准的对照图谱，然后将待检验的药材按照标准对照图谱的条件，作出色谱图，与标准指纹图谱比较共有峰的相似度，符合标准（>0.99以上）的为真品，否则为伪品；对共有峰中已知成分（有对照品）的指纹，进行含量测定，在最低标准以上的成分，含量越高，质量越好。

原文由 user007 发表:

原文由 bc8000 发表:

原文由 user007 发表:
弱弱地问句：如何从指纹图谱看中草药的质量差别和真伪鉴别？小弟看过一些资料，但是存在一些疑问，一直没整明白？

通过做多批次（10批以上）药材的hplc色谱图谱，选择出其中的共有峰（即指纹图谱），产生一个标准的对照图谱，然后将待检验的药材按照标准对照图谱的条件，作出色谱图，与标准指纹图谱比较共有峰的相似度，符合标准（>0.99以上）的为真品，否则为伪品；对共有峰中已知成分（有对照品）的指纹，进行含量测定，在最低标准以上的成分，含量越高，质量越好。

小弟对这个“标准的对照图谱”一直存在疑惑，中药材原料成分极其复杂，各个地区出产的药材可能会不尽相同。我不清楚有没有人做过这些实验？这些基础数据怎样？hplc色谱图谱是某一个波长下的所有有吸收的物质的图谱。如果原料已经进行了人为的加工（这些加工对原料的影响未知），在此情况下，实验室用标准方法来判定其真伪，会不会有漏洞？小弟一直不解，望交流学习。