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液相色谱（LC）

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主题：【求助】关于色谱柱的清洗，柱压和基线问题，请教各位

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dong13410

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发表于：2009/06/16 13:27:32 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我们实验室的色谱放了有半年没人用了，我现在想用，但是柱子冲了几天了（用甲醇和水更改比例来洗的），基线一直跑不平，而且用甲醇和水的比例为10：90时，柱压有2500多，之前仪器用来做过血清样品，我想请教各位，我应该怎么清洗柱子比较好呢，着急做实验，可是基线跑不平，

柱压是不是太高了，柱子有问题啊？
还有就是用甲醇和水50：50的是不是很不好呢？为什么呢？
我的柱子是C18，250mm*4.6mm的柱子

头一次用色谱，还有很多不懂，希望各位帮帮忙，谢谢了

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2009/6/16 14:28:10 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

50：50的甲醇水比列，是压力最高的，相应也是最容易产生气泡的。流动相要做好抽滤，脱气处理。柱子可以换乙腈水冲洗下，比甲醇的洗脱力，强些。如果还不行，可以用异丙醇低流速清洗。，做血清的样品，不清洗好，对柱子影响很大。
不行就换根新柱子吧

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895642310fhj338

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2009/6/16 14:49:54 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

换根新柱子试试。

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老多_小多

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2009/6/16 15:28:21 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱子用纯甲醇冲

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有水有渝

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2009/6/16 20:41:00 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

先再生一下看看,不行就反冲,纯甲醇低流速冲12个小时.

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石蛋

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2009/6/17 8:46:13 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

还是换根柱子试试，因为你不知道原因，可以挨个排查。或许是别的问题导致压力很大

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知足常乐！

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2009/6/17 15:46:03 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 dong13410 发表:
我们实验室的色谱放了有半年没人用了，我现在想用，但是柱子冲了几天了（用甲醇和水更改比例来洗的），基线一直跑不平，而且用甲醇和水的比例为10：90时，柱压有2500多，之前仪器用来做过血清样品，我想请教各位，我应该怎么清洗柱子比较好呢，着急做实验，可是基线跑不平，柱压是不是太高了，柱子有问题啊？
还有就是用甲醇和水50：50的是不是很不好呢？为什么呢？
我的柱子是C18，250mm*4.6mm的柱子

头一次用色谱，还有很多不懂，希望各位帮帮忙，谢谢了

柱子的原因
柱子太脏了，估计冲不会来了，基本报废

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pfz1985

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2009/6/17 15:52:33 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

放置时间太长了！柱子怎么保存的？很可能报废了！

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dong13410

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2009/6/17 19:59:12 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱子肯定报废了吗？？？
我刚准备用的时候，看到四个装试剂的瓶子里面有些都空了，管子里面长霉了，这样的情况柱子肯定没得救了是吧？

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Last edit by dong13410

庐山居士

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2009/6/17 20:19:28 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 dong13410 发表:
柱子肯定报废了吗？？？
我刚准备用的时候，看到四个装试剂的瓶子里面有些都空了，管子里面长霉了，这样的情况柱子肯定没得救了是吧？

液相长期不用，溶剂瓶最好全部清空，另外溶剂瓶与泵之间的管道中残存的溶剂，一定要用纯甲醇将它全部置换掉，否则像水和缓冲盐之类会生长霉菌，建议你断开色谱柱，接上两通，以稀硝酸冲洗管道和流通池，全部冲洗干净后，再接上色谱柱冲柱子。

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dong13410

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2009/6/18 11:35:08 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 shixiangqun 发表:
原文由 dong13410 发表:
柱子肯定报废了吗？？？
我刚准备用的时候，看到四个装试剂的瓶子里面有些都空了，管子里面长霉了，这样的情况柱子肯定没得救了是吧？

液相长期不用，溶剂瓶最好全部清空，另外溶剂瓶与泵之间的管道中残存的溶剂，一定要用纯甲醇将它全部置换掉，否则像水和缓冲盐之类会生长霉菌，建议你断开色谱柱，接上两通，以稀硝酸冲洗管道和流通池，全部冲洗干净后，再接上色谱柱冲柱子。

要用多大的浓度的硝酸来洗啊？

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