紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】请问如何确定紫外吸收截止波长?

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standylee
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如题,如何确定紫外吸收截止波长?一般将吸光度为多少时的波长认定为截止波长呢?谢谢。
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理论上应该是你所使用的仪器在测试波长下调不到T=100%,就不能用该溶剂了。实际使用中,应该还要考虑噪音问题,因此需要保留一定余量,一般至少10%。
dickwang2008
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这个主要看你使用的是什么溶剂做了流动相。从网上可以查到相关的截止波长是多少。
standylee
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谢谢两位大虾的回复。我是菜鸟,还是没有明白,我想知道的是如何根据测定得到的紫外吸收光谱来确定紫外吸收截止波长?比如甲醇的截止波长是210 nm,这个数据是根据什么来确定的?如果已经测得一未知溶剂的吸收光谱,如何知道它的吸收截止波长?谢谢!
tutm
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这里所说的截止波长(极限波长)应该就是指该物质在此波长以下不能再作为溶剂使用了,因为该溶剂在截止波长以下已经有较高吸光度了,可能会对测试造成影响。

至于溶剂吸光度达到多少就不能用了(达到截止波长了),这也没有一个明确的规定,有时各种资料上列出的数据也有差异,应该是个参考值,如你上面写的甲醇210nm,也有书上写220nm。其实要看你的应用,如果你的样品摩尔吸光度远高于溶剂,而又找不到更理想的溶剂,而该溶剂还能调吸光度零点,吸光度噪声也无太大影响;这样条件下,溶剂应该还可以“试用”一下。在科研中,这种情况蛮多的。
夕阳
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原文由 standylee 发表:
谢谢两位大虾的回复。我是菜鸟,还是没有明白,我想知道的是如何根据测定得到的紫外吸收光谱来确定紫外吸收截止波长?比如甲醇的截止波长是210 nm,这个数据是根据什么来确定的?如果已经测得一未知溶剂的吸收光谱,如何知道它的吸收截止波长?谢谢!


先做仪器基线校正,然后将甲醇置入比色皿中,做800nm至200nm的扫描,你会发现,甲醇的基线在230nm以前(长波长方向)吸光度基本是0,待到扫到220nm处时,吸光值突然上升到很大很大,这就是截止波长判断的粗略和简单的试验。你亲自动手试试吧?



给你传一张甲醇的图谱
祥子
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原文由 anping 发表:
先做仪器基线校正,然后将甲醇置入比色皿中,做800nm至200nm的扫描,你会发现,甲醇的基线在230nm以前(长波长方向)吸光度基本是0,待到扫到220nm处时,吸光值突然上升到很大很大,这就是截止波长判断的粗略和简单的试验。你亲自动手试试吧?


anping老师解释的通俗易懂。

嘿嘿,越看anping老师的头像越可爱啊。
ldgfive
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原文由 standylee 发表:
如题,如何确定紫外吸收截止波长?一般将吸光度为多少时的波长认定为截止波长呢?谢谢。

这个主要取决于你使用的溶剂
standylee
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原文由 tutm 发表:
这里所说的截止波长(极限波长)应该就是指该物质在此波长以下不能再作为溶剂使用了,因为该溶剂在截止波长以下已经有较高吸光度了,可能会对测试造成影响。

至于溶剂吸光度达到多少就不能用了(达到截止波长了),这也没有一个明确的规定,有时各种资料上列出的数据也有差异,应该是个参考值,如你上面写的甲醇210nm,也有书上写220nm。其实要看你的应用,如果你的样品摩尔吸光度远高于溶剂,而又找不到更理想的溶剂,而该溶剂还能调吸光度零点,吸光度噪声也无太大影响;这样条件下,溶剂应该还可以“试用”一下。在科研中,这种情况蛮多的。


谢谢,你详细的讲解使我受益匪浅。
standylee
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原文由 anping 发表:

先做仪器基线校正,然后将甲醇置入比色皿中,做800nm至200nm的扫描,你会发现,甲醇的基线在230nm以前(长波长方向)吸光度基本是0,待到扫到220nm处时,吸光值突然上升到很大很大,这就是截止波长判断的粗略和简单的试验。你亲自动手试试吧?



给你传一张甲醇的图谱


谢谢你。
yukepotato
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原文由 tutm(tutm) 发表:
这里所说的截止波长(极限波长)应该就是指该物质在此波长以下不能再作为溶剂使用了,因为该溶剂在截止波长以下已经有较高吸光度了,可能会对测试造成影响。

至于溶剂吸光度达到多少就不能用了(达到截止波长了),这也没有一个明确的规定,有时各种资料上列出的数据也有差异,应该是个参考值,如你上面写的甲醇210nm,也有书上写220nm。其实要看你的应用,如果你的样品摩尔吸光度远高于溶剂,而又找不到更理想的溶剂,而该溶剂还能调吸光度零点,吸光度噪声也无太大影响;这样条件下,溶剂应该还可以“试用”一下。在科研中,这种情况蛮多的。


恩,是的。就是说你在检测时,检测波长应大于你选用的溶剂的截止波长。
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