主题：【讨论】实验室不可不知的１５个常识，回答正确加分

我怎么一题都不知道呢

原文由 375634973 发表:
我怎么一题都不知道呢

在看一看，只要是在实验室，肯定会答出来的

1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？
  保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。
2.如何将不同构型的质粒DNA区别开？
由于不同构型的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率不同，ccc DNA的泳动速度最快，通过凝胶电泳方法可将不同构型的DNA区别开。
3.用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时，通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇，为什么？
  异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。
  4.用乙醇沉淀DNA时，为什么加入单价的阳离子？
  用乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液中加入单价的阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na+中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。
  5.在提取RNA时经常使用异硫氰酸胍，有什么作用？
  RNA是一种极易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异硫氰酸胍使细胞结构迅速被破坏，使RNA从细胞中释放出来。同时高浓度异硫氰酸胍还使细胞内的RNA酶失活，使释放出的RNA不被降解。
  6.蛋白印迹中封闭液的作用？
封闭液的作用是封闭未吸附蛋白的部位，以减少非特异性结合背景的影响。常用的封闭液有脱脂奶粉、小牛血清等。
  7.DNA通常保存在什么缓冲液中？
采用TE缓冲液，Tris-HCl的缓冲系统，加入EDTA可以螯合二价金属离子进而抑制依赖于二价金属离子的DNA酶的活性，对DNA起到保护作用。
  8.在酶切反应缓冲液中为什么加入BSA？
  通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。
  9.简单的克隆载体必需包括什么？
  复制起点；选择标记：主要是抗性基因；多克隆位点：便于外源DNA的插入。
  10.用酚抽提细胞DNA时，有什么作用？
  使蛋白质变性。
  11.在分离DNA时，要使用EDTA，为什么？
  EDTA是金属离子螯合剂，螯合二价离子，抑制核酸酶的活性。
12.在分离DNA过程中，造成DNA分子断裂的因素有哪些？
  核酸酶降解；化学降解；物理剪切。
  13.使用离心机应注意什么？
  首先应该根据自己的实验需求选择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心机时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格 平衡样品。安装转子和转子盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心机异常应立即关闭离心机。离心结束后要安放好转子。
  14.分子生物学实验室常用的灭菌方法有哪些？
  高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂消毒、过滤除菌
  15.使用移液器有哪些注意事项？
  垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用；选择与移液器匹配的枪头，安装枪头时不要用力太猛；移液器每日用完后，应旋到最大刻度。
(搜自科学网)

13.使用离心机应注意什么？
1.放置离心管的时候一定要对称的放置！这样才能转起来平衡
2.在开启离心机的时候一定要将离心机的盖子盖上，飞出来很危险哦
3.开启和关闭离心机的时候一定是速度慢慢增加或者减小的，不能一下子使速度改变很快

了解了，谢谢，但是我们有不少是没有的

只会13和15题！~

知道知不道

惭愧，一题都不会。

离心管的放置也很重要，否则容易破碎

垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用

对最后一题最熟悉

这里面好几个可不是常规实验室必知的