原文由 handsomeland 发表:
您的结论我很赞赏,不过您的论证过程我有一些不明白的地方请教:
1、从第二幅图可以看出您感兴趣的事件表现在250-350nm,而这个是紫外分光计的边界区域,说服力不强,且您研究滞后效应,而仪器在工作一段时间之后也可能发生谱线变化,当然如果您有各个反应物单独的一段时间观察的紫外光谱做对照就能澄清这个疑问。
2、物性的变化,如果是真实的话,一定对应着结构的变化,您提到红外和透射电镜,不知道结果怎样?
3、从第三幅图和第四幅图可以看出不同样品之间的差异和您感兴趣的变化的差异在一个范围内,也就是说,如果您将第四幅图放上error bar的话,我认为很难从旋光差异在150nm-250nm波长之间的变化说明什么问题。
4、作图技术有待提高(坐标轴说明,字号,最好自成体系),而且建议为这个帖子单独建立一个图片编号。
感谢您对本帖的关注。几个问题解释如下:
1、仪器比较稳定,半年多一直在用它做各种条件下的生物矿化实验,也做过不少空白和稳定性实验,没有发生谱线变化。这不是偶然的现象。
2、有电镜和X衍射照片可以说明问题(图题编号与上帖无关)。
有关的分析和讨论见相关文章。
3、生物矿化过程中的圆二色光谱图中,随着时间推移,下部的倒峰逐渐上移,峰值向右移。(开始作用的曲线在最下部,终结时在最上部)
氯化钙对胶原自组装(在PH7.2附近会自动组装成纤维)的影响,反映在圆二色光谱随着时间推移,倒峰从上到下逐渐下移。与矿化的曲线变化方向相反
胶原自组装时(无钙离子),圆二色光谱随时间的变化曲线
比较三图知,胶原自组装成纤维时(三股多肽链的螺旋内部及分子之间应该更紧密,因为它们通过氢键及其他残基结合成纤维,对应于倒峰下移),钙离子的介入,产生类似变化规律,表明钙与肽键上的基团,主要是酰胺基,与钙配位,使肽键有紧旋的趋势,故与自组装类似。作用基团的研究结论,见下面的红外光谱。而矿化的光谱变化与自组装的圆二色相反,可能是无机物HAP的生成,弱化了肽键上基团与钙的作用,使肽链结构有松驰的变化。
4、红外光谱,做了含氯化钙、纯胶原、矿化生成磷酸钙-胶原材料及材料被盐酸溶解并洗脱无机离子的复原胶原的三组样品,见下图
钙离子及磷酸钙的存在,导致胶原蛋白I、II、III三个酰胺带的弱化和消失(注意:I带弱化,它仅对应于伸缩振动,II、III带还对于摇摆振动,故完全消失),说明,存在一种化学作用,而且定位在酰胺基上。
磷酸钙的洗脱,胶原又恢复原状,说明其作用是一种可逆的,无破坏性的化学作用,推测是配位作用,与酰胺基的配位。由此,得出了第二类成核位点的观点。
其他进一步的讨论不再详述。毕竟这里不是某课题的专业学术探讨的地方,我得打住了。
由于以上图片是实验数据的粗略处理,极不规范,敬请见谅。