主题:【求助】色谱柱出现问题!

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yile21
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我用的是迪马的C18柱子,用了没多久,前几天处理的样品(为一个喷剂)有一定粘度,但是我们会离心沉淀将粘的辅料去掉取上清进样的。前几天基本正常,今天进对照品的时候对照品峰半峰高处出现了一个很大的肩峰,像是两个东西没分开似的。但是同样的对照品溶液昨天进还是好的。后来又进了几针对照品溶液和处理好的样品溶液,都是在主峰位置都是这样的情况,出现肩峰,我们换了一根色谱柱做对照品,没问题,所以说是柱子出了问题。怀疑样品还是太黏,但是柱子没有被堵住,因为压力还是不高的,请问这种情况下,该怎样清洗柱子或者采取什么办法挽救?
不知道我表述清楚了没,快急坏了。
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pandora98
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原文由 yile21 发表:
我用的是迪马的C18柱子,用了没多久,前几天处理的样品(为一个喷剂)有一定粘度,但是我们会离心沉淀将粘的辅料去掉取上清进样的。前几天基本正常,今天进对照品的时候对照品峰半峰高处出现了一个很大的肩峰,像是两个东西没分开似的。但是同样的对照品溶液昨天进还是好的。后来又进了几针对照品溶液和处理好的样品溶液,都是在主峰位置都是这样的情况,出现肩峰,我们换了一根色谱柱做对照品,没问题,所以说是柱子出了问题。怀疑样品还是太黏,但是柱子没有被堵住,因为压力还是不高的,请问这种情况下,该怎样清洗柱子或者采取什么办法挽救?
不知道我表述清楚了没,快急坏了。


1.样品前处理只靠离心是远远不够的,最好是能用0.45um或者0.22um的膜过滤以后再进样。
2.色谱柱使用时柱前最好能使用保护柱,样品上有脏东西可以用保护柱来抵挡一下。
3.柱子现在肯定是污染了,比较合适的处理方法是冲洗,最好的办法是将柱子捯接,以0.2ml/min的流速用纯乙腈冲洗过夜,还不好可以试试二氯甲烷和四氢呋喃,但是时间最好不要太长。柱子能不能捯接先打电话问问柱子厂家或者销售。
flytiger603
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我用的是迪马的C18柱子,用了没多久,前几天处理的样品(为一个喷剂)有一定粘度,但是我们会离心沉淀将粘的辅料去掉取上清进样的。前几天基本正常,今天进对照品的时候对照品峰半峰高处出现了一个很大的肩峰,像是两个东西没分开似的。但是同样的对照品溶液昨天进还是好的。后来又进了几针对照品溶液和处理好的样品溶液,都是在主峰位置都是这样的情况,出现肩峰,我们换了一根色谱柱做对照品,没问题,所以说是柱子出了问题。怀疑样品还是太黏,但是柱子没有被堵住,因为压力还是不高的,请问这种情况下,该怎样清洗柱子或者采取什么办法挽救?
不知道我表述清楚了没,快急坏了。

那就是柱子的问题了
有没有加预柱,样品过滤没有问题吧?
是所以的峰都有肩峰还是就主峰有?
要是所有的都有,那就考虑柱头塌陷;要是就主峰有,那就是柱子脏了,清洗
yile21
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原文由 flytiger603 发表:
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我用的是迪马的C18柱子,用了没多久,前几天处理的样品(为一个喷剂)有一定粘度,但是我们会离心沉淀将粘的辅料去掉取上清进样的。前几天基本正常,今天进对照品的时候对照品峰半峰高处出现了一个很大的肩峰,像是两个东西没分开似的。但是同样的对照品溶液昨天进还是好的。后来又进了几针对照品溶液和处理好的样品溶液,都是在主峰位置都是这样的情况,出现肩峰,我们换了一根色谱柱做对照品,没问题,所以说是柱子出了问题。怀疑样品还是太黏,但是柱子没有被堵住,因为压力还是不高的,请问这种情况下,该怎样清洗柱子或者采取什么办法挽救?
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那就是柱子的问题了
有没有加预柱,样品过滤没有问题吧?
是所以的峰都有肩峰还是就主峰有?
要是所有的都有,那就考虑柱头塌陷;要是就主峰有,那就是柱子脏了,清洗


我测得就一个峰,没其他峰了。清洗的话已经清洗很多次了,还是不行。
wangjinxia
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你就洗吧顺序是:5%甲醇水-甲醇-二氯甲烷-正己烷-二氯甲烷-甲醇,每个用1.0ml/min流速洗半小时 会好的。
wangjinxia
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wangjinxia
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用5%甲醇水-甲醇-二氯甲烷-正己烷-二氯甲烷-甲醇洗格半小时
richies
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