快速导航采购仪器提醒

液相色谱（LC）

版主:

入住本版

专家:

仪器信息网

居民列表

仪器社区 > 色谱 > 液相色谱（LC）帖子详情

快速回复发表新帖最新帖

返回列表

主题：【求助】HPLC的样品预处理和测定问题

浏览0 回复8 电梯直达

laidewanle

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2009/09/03 10:34:42 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

悬赏金额：20积分状态：已解决

各位好，没用过液相，现在想要用HPLC检测药品在分离提纯一系列过程中A、 B 、C三个组分的含量变化。问题是样品有时候在成分复杂的水溶液中（几种金属离子蛋白色素等），有时候在醇溶剂中，有时候在醇溶剂和盐酸的混合溶液中，脱色最后才是成品。因为主要检测这些过程中几个组分的含量变化，所以不能也不易每步都得出样品干粉。
请问能直接进样么（有时候水溶液，有时候醇溶液，有时候含醇的水溶液）？不同溶剂对峰的保留时间和含量的测定有影响没？是不是还需要每次洗柱子啊？或者怎么处理下？

水溶液可以离心过滤，甚至活性炭脱色，是不是要把蛋白用什么东东滤去啊？醇是丁醇（所以会和流动相中的水溶解不太好），不过液相进的样少不知道能做不

推荐答案：小余儿回复于2009/09/03

样品的前处理很重要的，最主要不能影响到色谱柱的柱效。

补充答案：

老多_小多回复于2009/09/03

如果杂质没干扰
控制下PH应该可以测定

hahahe回复于2009/09/03

含有无机离子没什么影响，醇溶液可能会挂不上柱，需要加水稀释后上样

小卢回复于2009/09/03

个人认为成分太复杂了，即使进样了有峰出来，也会很多且分离不好。
建议按照各自的特点继续分离，直至得到单一或固定的成分，再进样分析。

知足常乐！回复于2009/09/04

只要对柱子没有破坏，影响应该不大

0
赞贴
8
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价

选参数看心得找厂商查方案

专属顾问快速对接

立即提交

可能感兴趣

老多_小多

禁止发帖修改昵称

ID：emoc98311

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/9/3 10:46:14 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果杂质没干扰
控制下PH应该可以测定

赞贴

拍砖

dickwang2008

禁止发帖修改昵称

ID：dickwang2008

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/9/3 10:52:45 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

注意测定的物质不要将色谱柱堵塞啦

赞贴

拍砖

hahahe

禁止发帖修改昵称

ID：hahahe

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/9/3 12:02:33 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

含有无机离子没什么影响，醇溶液可能会挂不上柱，需要加水稀释后上样

赞贴

拍砖

小卢

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/9/3 16:29:51 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

个人认为成分太复杂了，即使进样了有峰出来，也会很多且分离不好。
建议按照各自的特点继续分离，直至得到单一或固定的成分，再进样分析。

赞贴

拍砖

土老冒豆豆

禁止发帖修改昵称

ID：tulaomaodoudou

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/9/3 19:28:12 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不同溶剂中该组分在LC中有无峰面积变化，你可以做下这个实验啊。如果实验结果证明同一组分在不同溶剂中进样，峰面积变化不大，那就放心了。

赞贴

拍砖

小余儿

禁止发帖修改昵称

ID：ywl168

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/9/3 20:00:55 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

样品的前处理很重要的，最主要不能影响到色谱柱的柱效。

赞贴

拍砖

〓猪哥哥〓

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/9/3 21:18:28 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 laidewanle 发表:
各位好，没用过液相，现在想要用HPLC检测药品在分离提纯一系列过程中A、 B 、C三个组分的含量变化。问题是样品有时候在成分复杂的水溶液中（几种金属离子蛋白色素等），有时候在醇溶剂中，有时候在醇溶剂和盐酸的混合溶液中，脱色最后才是成品。因为主要检测这些过程中几个组分的含量变化，所以不能也不易每步都得出样品干粉。
请问能直接进样么（有时候水溶液，有时候醇溶液，有时候含醇的水溶液）？不同溶剂对峰的保留时间和含量的测定有影响没？是不是还需要每次洗柱子啊？或者怎么处理下？

水溶液可以离心过滤，甚至活性炭脱色，是不是要把蛋白用什么东东滤去啊？醇是丁醇（所以会和流动相中的水溶解不太好），不过液相进的样少不知道能做不

建议最好处理下。不同溶剂溶解只要色谱条件不变，出峰不会相差很多。溶剂峰有时区别。由于样品不一样、处理不一样，建议走完之后用梯度冲洗，然后恢复初始比例平衡，平衡时间适当长些。水溶液可以离心过滤，活性炭脱色去色素，蛋白也可以离心取上清液，当然也可以让蛋白沉淀下来。丁醇与你的流动相相容吗？如果不相容尽量进样量小点。容易导致柱子残留污染。
做上面的样品，一定加根预柱，防止分析柱柱效下降！

赞贴

拍砖