主题：【第二届网络原创作品大赛】毛细管电泳样品吸附问题及解决方法！

毛细管电泳分离药品拖尾现象

电泳是在电解质溶液中，带电粒子在电场作用下，以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现象叫电泳（Electrophoresis）。以石英毛细管为分离通道，依据样品中各组成成分之间淌度（即溶质在单位时间间隔内和单位电场下移动的距离）和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
毛细管电泳所用的毛细管是由石英玻璃拉制的，在水溶液中由于硅烷醇基团离子化作用，使其内表面带负电荷，于是管壁和电解质界面上形成双电层，在外加电场作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体地向阴极流动，形成电渗流（Electroosmotic Flow，EOF）。


            图1 毛细管电泳电渗流的形成及阳离子运动方向图

从上图我们可以看到毛细管管壁实际是有很多硅羟基电离而形成的O-离子，管壁O-离子吸附溶液中的阳离子，在高压电场的作用下，阳离子向阴极发生整体移动，从而形成了电渗流，但是在我们分离的过程中，往往有很多的药品容易被毛细管管壁所吸附，使谱图严重拖尾，不能达到我们分离的目的，如我们在分离手性药物的时候，毛细管管壁对药物产生了严重的拖尾现象。
分别从三个方面考察了对样品吸附的影响：
1.缓冲溶液pH的影响
pH是影响毛细管电渗流的一个重要因素，pH在3-8之间时随着pH的增大电渗流迅速增大，通过调节pH值可以改变离子的带电情况，比如图2是一种手性化合物分子结构式，在碱性条件下，分子容易给出一个质子，使分子带上负电荷，这样不容易被毛细管管壁吸附，但是，电泳中负电荷并不容易被检测器所检测到，所以我们只能通过改变溶液的pH值，从而来改变分子的电性，此分子在碱性酸性条件下，季胺基上的氮原子易接受一个质子形成配位键，使分子带上正电荷，容易被电泳检测到，但是带正电荷的样品在一定情况下很容易被毛细管管壁所吸附，分离谱图见图3。


图2 手性化合物分子结构式

图3 毛细管分离手性药物拖尾谱图
2.电压对样品吸附的影响
增大电压，由原来的20kV增加到25kV，图4是增大电压后样品的谱图，可以看出，增大电压，只能有效的改善样品的保留时间，而对样品吸附现象效果改善不是很明显。因为增大电压，在某种程度上来说是增大了毛细管电泳的电渗流，对缩短样品的保留时间有很大的帮助！对样品吸附现象不是很严重的时候可以选择适当提高电压来改善吸附现象！


图4 增大电压后的分离谱图

3.有机调节剂对样品吸附的影响
为了获得更好的拆分效果，可以考虑向缓冲溶液中加入一定量的有机调节剂，来改善样品的拖尾现象。试验证明对拖尾严重的样品，加入适量的有机调节剂，能有效的改善样品的吸附现象。在毛细管电泳中比如尿素，试验证明它能很好的改善分离样品的峰型，十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)，是一种阳离子表面活性剂，加入适量情况下可以用来改变电渗流的方向，经过试验证明分离此种药物时，在缓冲溶液中加入三羟甲基氨基甲烷(Tris)，吸附现象可以得到很好的改善，如图5。


图5 加入有机调节剂后的分离谱图

小结：在采用毛细管电泳法分离手性药物或是其他样品时，影响样品的分离情况是多方面的，比如说pH值、电压、缓冲溶液浓度、柱温等，但当样品出现吸附现象时可以从这几个方面改善。

版主总结的很全面，这次从理论上学习到了电泳发生吸附样品现象是什么原因！谢谢版主！

吸附样品原来是这样的！谢谢斑竹！

跟版主学到了真正的知识。讲的很透彻！容易让你理解！

讲的挺透彻的  谢谢斑竹

版主讲解的非常全面  谢谢

毛细管电泳中的温度效应可能也有一些影响。

谢谢斑竹！又学到有用的东西了！

最实用的三种方法：
1： 极端PH值
2： 动态吸附法
3： 涂层法

版主讲的很详细，也很清晰，很容易让人理解，还是第一次看见这样的文章，真的感谢版主！