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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】电泳电流问题

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wangruiting
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发表于：2011/11/10 10:20:31 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好 我用相同的电泳条件 电流每天都不一样 很不稳 而且 这几天每一天的电流都比前一天大 这是什么原因呢
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nini2006
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2011/11/10 10:45:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
CE的重现性本身就比较差，要想每天情况完全一致难度比较大。只要波动范围不是很离谱就无所谓。你说的很不稳定大概偏差多少？当然，你要确保毛细管的温度每天一致，每天冲洗毛细管所用的试剂顺序时长要一致。
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feng861024
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2011/11/10 15:18:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
毛细管的电流跟湿度及使用的缓冲液的离子浓度关系比较大，这个没啥关系的。
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wangruiting
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2011/11/11 9:55:05 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
CE的重现性本身就比较差，要想每天情况完全一致难度比较大。只要波动范围不是很离谱就无所谓。你说的很不稳定大概偏差多少？当然，你要确保毛细管的温度每天一致，每天冲洗毛细管所用的试剂顺序时长要一致。

偏差在几微安吧 温度是一致的
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ericwong
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2011/11/11 10:57:35 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好保证每天使用的缓冲液也相同，比如说都是重新配制
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nini2006
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2011/11/11 14:42:12 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wangruiting(wangruiting) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
CE的重现性本身就比较差，要想每天情况完全一致难度比较大。只要波动范围不是很离谱就无所谓。你说的很不稳定大概偏差多少？当然，你要确保毛细管的温度每天一致，每天冲洗毛细管所用的试剂顺序时长要一致。

偏差在几微安吧 温度是一致的


几微安似乎有点点大，当然像楼上说的，保持buffer一定，这是常识，估计你不会不懂，必要的话，跑了几小时后更换buffer，以保持离子强度恒定。你再多注意下电泳前的预冲洗（即NaOH，水，buffer的冲洗），尽量保持冲洗时间恒定。
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2011/11/11 15:48:51 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:
最好保证每天使用的缓冲液也相同，比如说都是重新配制

是的 每天的缓冲液都是新配的
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wangruiting
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2011/11/11 15:51:52 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 wangruiting(wangruiting) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
CE的重现性本身就比较差，要想每天情况完全一致难度比较大。只要波动范围不是很离谱就无所谓。你说的很不稳定大概偏差多少？当然，你要确保毛细管的温度每天一致，每天冲洗毛细管所用的试剂顺序时长要一致。

偏差在几微安吧 温度是一致的


几微安似乎有点点大，当然像楼上说的，保持buffer一定，这是常识，估计你不会不懂，必要的话，跑了几小时后更换buffer，以保持离子强度恒定。你再多注意下电泳前的预冲洗（即NaOH，水，buffer的冲洗），尽量保持冲洗时间恒定。

恩 我的缓冲液每天都是新配的 也及时的更换了 不知道是怎么回事 之前换过缓冲液后就出峰了 这次 换后也没有 只有溶剂峰 后来又进很多针 又出峰了 但是重现性不好
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ericwong
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2011/11/11 17:38:49 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
CE电流有多大？
做的什么样品？用的什么缓冲液？
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wangruiting
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2011/11/11 22:36:54 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:
CE电流有多大？
做的什么样品？用的什么缓冲液？

做的水果提取物  30mMTris-30mM磷酸二氢钾 电流一般都是30多微安
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moonkingg
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2012/1/5 13:24:46 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
考虑过柱子吗？
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