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原文由 richies(richies) 发表:
最初级的制备色谱,就是自己填装柱子走常压,填料可以是硅胶,凝胶,也可以是高分子树脂
俺大学毕业,进了一个研究所,从事生物工程研发
上班第一天,老板让俺干的第一件事情,就是做层析,纸层析,把新华滤纸剪成一长条,点样,放在层析缸里面走,走完用电吹风吹干,放到紫外观察箱里面去查看斑点位置,再把该斑点剪下来,用溶剂萃取洗脱,最后去用紫外分光光度计定量,我觉得,这个就是最简单的制备色谱,用滤纸作为层析介质,制备出我们要的样品后去定量分析
后来,做另外一个样品,第一次为了制备样品做色谱,用的是大孔吸附树脂XAD-2,常压制备,上样.先用一种溶剂系统洗涤掉大部分的杂质,换一种溶剂系统把我们目标产物洗脱下来,通过一次常压色谱,纯度可以达到75%以上,这个是我第一次使用制备色谱,后来还用了中压的50um的硅胶和高压的15um硅胶做过制备,不过给我印象最深的还是刚刚开始接触的那些懵懂岁月
现在我们讨论的制备色谱,大部分说的是加压色谱,根据压力的不同,分为高压和中压,其实,这些都还是做小分子用到的硅胶色谱系统,而在生物工程领域,也大量使用制备色谱,只是大家不怎么去讨论,最常见的就是,我们经常使用的sephadex凝胶系统,其实,他也是制备色谱,中/低压制备,用蠕动泵给液,在葡聚糖凝胶里面进行分离
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