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液相色谱（LC）
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主题：【求助】弱弱的问下，为什么反相色谱的流动相必须加水？

浏览0 回复18 电梯直达
benbenzuo
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发表于：2009/09/28 08:43:07 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如题，哪位高手能从原理上，最根上，给俺解释一下吗？假如用纯有机相，样品保留符合要求，也必须加水吗？
我知道为什么不能用纯水冲系统，但是不知道为什么不能用纯有机相 测试？
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有水有渝
xky0230699
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2009/9/28 9:33:02 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以都用有机相，但你的样品极性不够弱的话，所有的峰都集中在2min处出峰，分不开，还跟溶剂峰合在一处，这样还能分析吗？
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〓猪哥哥〓
03yx2
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2009/9/28 9:50:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不是必须加水，是大多数情况下需要水，或水溶液。

有的不用水，有的只用水溶液，如纯缓冲体系
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benbenzuo
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2009/9/28 11:19:09 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xky0230699 发表:
可以都用有机相，但你的样品极性不够弱的话，所有的峰都集中在2min处出峰，分不开，还跟溶剂峰合在一处，这样还能分析吗？

你的意思是说样品没保留，全都在流动相中了吧？假如样品也有所保留呢？你能具体说下，水的作用么？
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benbenzuo
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2009/9/28 14:31:27 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我刚刚在一本资料上发现了这个问题的答案，原来存在一种非水反相HPLC，主要用于强疏水性样品的分离，如脂类、合成聚合物，其中流动相通常为高极性（A）和低极性（B）有机溶剂的混合，一般来说，A溶剂为ACN或MeOH，B溶剂为THF、氯仿、二氯甲烷、丙酮
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mon1126
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2009/9/28 15:16:52 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不一定要用水，流动相极性大于固定相极性的情况下才用反相色谱，所以在保证流动相极性大于固定相极性的情况下就可以进行实验了。但是这个基本前提你保证不了的话就要用水提高流动相极性。
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cuijl
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2009/9/28 15:18:31 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 benbenzuo 发表:
我刚刚在一本资料上发现了这个问题的答案，原来存在一种非水反相HPLC，主要用于强疏水性样品的分离，如脂类、合成聚合物，其中流动相通常为高极性（A）和低极性（B）有机溶剂的混合，一般来说，A溶剂为ACN或MeOH，B溶剂为THF、氯仿、二氯甲烷、丙酮



学习了。
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柏坡
hgycook
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2009/9/28 21:45:44 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉添加水是为了调节流动相得极性，从而得到适合洗脱能力。
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虫子
cooper_y820415
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2009/9/29 9:47:39 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好像跟粘度有关吧 ，专家来解释下
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有水有渝
xky0230699
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2009/9/29 18:13:24 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cooper_y820415 发表:
好像跟粘度有关吧 ，专家来解释下

流动相加水就是用于调节流动相的极性，进而影响溶质的容量因子，达到分离样品的目的，维生素E你用纯甲醇做流动相也要比较长时间才出峰，我用过98%的甲醇，20分钟后才出峰（具体多少忘了）
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c02405
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2009/9/29 22:00:09 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不一定要加水啊

我们做维生素A和维生素E时就是用纯甲醇做流动相的啊
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