(板油hailingfei2006):
前提:
1之前为了建立方法,摸索
液相个组分比例,调节乙腈、甲醇、20mm的磷酸二氢钾的各比例,用了一天,正常操作,没问题。
2后来换20mm的磷酸二氢钾为pH=3.66醋酸水溶液,因为红色警报问题,柱子在乙腈和甲醇,以及pH3.66的环境下,静置了2天。
3前天修好设备,正常的水-甲醇水-甲醇,冲柱子。
4昨天进样DMSO含药母液10ul一针,调节调节乙腈、甲醇、20mm的磷酸二氢钾的各比例,上午操作没问题,下午6点左右发现柱压很低,经检查发现漏液,后拧紧柱子前端的peek(对?)漏液停止,但是压力不稳,跳动很大,后经purge阀除气饱而解决。紧接着,就发现,在50:50的甲醇水当中,柱压很大,立即调节比例为甲醇水10:90,流速0.3,冲了一个晚上,至目前,柱压很高。
问题:
柱压高。表现为,水:甲醇=90:10,柱温35℃,流速1.0ml/min,柱压为152bar。
措施:
分析可能是之前用磷酸盐缓冲液造成晶体析出,所以用水:甲醇=90:10,流速为0.3ml/min冲了一个晚上,今早上来,升至流速为1.0,柱压仍未152,后来提高柱温为40℃,希望增加磷酸盐溶解,冲柱3小时,柱压稳定为146。考虑到柱压变化不大,认为可能有其他杂志,故提高甲醇比例,但是柱压立马就上来,试着纯甲醇,柱压飙升至170还在往上涨,本人立刻将流速将为零,调节至低甲醇比例。
目前,学生不知怎么办:
1是柱前压力大,还是柱后压力大?怎么操作?
2用异丙醇冲,为什么?怎么个比例和操作要求?(流速、柱温,适用条件?)
3要把柱子扯下来,超声么?用纯甲醇超声?柱子上那些配件可以去掉?
4反冲,什么情况下反冲,会不会很折寿柱子?
5柱压降到什么水平算是正常水平?(甲醇水=10:90),什么范围内我可以进行自己的实验?