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液相色谱（LC）

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主题：【原创】急急！！检测器响应值与设定的波长有关吗

浏览0 回复4 电梯直达

yufang_1234

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发表于：2010/03/03 12:22:47 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我用的是安捷伦1200的我用仪器检测出我的样品的最大吸收在194nm 还有次吸收246nm（很小不是太明显）这样肯定是用246nm对吧可是我测量时发现我测的产品在225nm的响应值却比在246nm的响应值高，测时使用的浓度是一样的我想问的是我到底要用哪个波长啊？是不是最大吸收波长时的响应值应该最大？？？请大家快来帮帮忙吧

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2010/3/3 18:32:06 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你好，新手版的帖子不会在最新1000帖显示的，看到的人很少，所以下次记得发到相关版面去。

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微雨燕双飞

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2010/3/3 19:33:43 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

帮您解决了。
使用HPLC-UV分析时，建立一个方法首先要对化合物进行光谱扫描，了解它在紫外-可见区的吸收情况，如您所说，它在194 nm和246 nm有两个吸收峰，通常情况下应选择吸收峰处的波长作为液相的检测波长，然而194 nm属于远紫外区，大多数化合物包括流动相在这里都有较高吸收(至于为什么，这涉及到分子结构以及价键跃迁，我就不细说了)，基线噪声和漂移严重，分析灵敏度反而不高，所以应选择其他波长。但242 nm未必是您最佳的选择，因为其他波长虽不是吸收峰，但某些波长下的吸收未必就比242 nm低，比如拿泰山和珠穆朗玛峰比，虽然泰山是山峰，但珠穆朗玛峰的山腰未必比泰山低。所以225 nm虽不是吸收峰，但它照样可以比242 nm的吸收高。选择波长不能单纯地看吸收强度，同时还要考虑基线噪声的高低。通常情况下，您可以从205~242 nm之间5 nm低增大，分别分析(恒定其他一切条件)，计算信噪比(S/N)，信噪比最高的那个波长就可以作为测试波长。以后分析时也如此。当然化合物所有吸收峰处于230 nm以上时可以不必如此。

该帖子作者被版主 xky0230699加 2积分， 2经验，加分理由：解释的很详细

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