理论上，凝胶色谱实验中的样品在填料上是完全没有保留的，可实际上样品和填料之间可能会存在一些相互作用，这就要求我们在使用不同凝胶色谱柱时不仅要注意流动相的应用范围，还要注意填料对样品的吸附。一旦填料对样品有吸附，就超出了凝胶色谱的分离机理的范畴。

一般的凝胶色谱冲洗的方法：
所有凝胶色谱柱的清洗方法是将凝胶色谱柱的进口和出口反接，用与分析时相同的流动相以试验流速的 8 0 ％的流量进行冲洗。这个方法可以将一部分吸附在柱子里的杂质冲洗掉，但不能保证百分之百的冲洗干净。

对流动相的要求
采用有机相做流动相时，要求最好使用分析纯的有机试剂，一般情况下用 0.22um的过滤器过滤一下就可以。对于水相 GP C，要求使用二次重蒸水，0.22um的滤膜过滤。

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2010/3/13 17:29:47 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

(2)峰漂移
我们在使用凝胶色谱分析样品时，有时会发现色谱峰的出峰时间发生迁移。在这里，我将一些常见
的出峰时间异常问题罗列如下。

色谱柱的安装和使用
(1)在连接色谱柱之前，应该预先用即将使用的流动相置换以前用过的流动相；
(2)当色谱柱保存不当或长时间不用时，在色谱柱的进口或出口处会有一些气泡。因此在连接色谱
柱前，要赶走这些气泡；
(3)连接色谱柱要注意标牌上进出口的方向；
(4)如果用较高的温度做分析试验，应首先在0．2到0．3mL／min的流速下，缓慢地升高温度。当温度
达到设定的温度时，再慢慢地提升到试验时所需的流速；
(5)如果色谱柱需要较长的时间才能平衡稳定，应该检查色谱柱连接处是否有漏液。

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2010/3/13 17:30:21 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

在凝胶色谱的使用过程中，有很多因素都会引起基线的波动。在这里，我们将一些可能引起凝胶色谱基线波动的原因以及解决方法汇总成下表，供大家参考。

从示差检测器的结构和原理上看，我们在实验中要注意几个方面：
(1)首先是温度。这个温度包括室温和实验温度。一般要求室温比实验温度低10％为最佳。在夏天尤其要注意空调器的出风口不能直接吹向仪器；
(2)流动相要脱气后再进入仪器。脱气的最佳方法是用在线脱气机。在线脱气机能够保证在3mL／min的流量时，出口处的含氧量为2ppm。没有在线脱气机的用户，可以每2个小时把流动相放入超声波仪做脱气处理。再次进样前，示差检测器要做一次清洗，即置换参比池中旧的流动相；
(3)当检测器中有气泡时，可以用改变流速的方法，来冲洗检测器；
(4)如果检测器中有污染，用流动相冲洗不出来时，可以采用15％的硝酸溶液清洗检测器。此方法应在有经验的工程师的指导下进行；
(5)如果使用含盐的流动相做实验。一定要在实验后用无盐的流动相冲洗检测器30分钟以上。绝对不能让盐保存在检测器的池子里，否则一旦池子里的流动相挥发，盐会沉积在池子的表面。池子污染后，再处理清洗是很麻烦的。

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