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液相色谱（LC）

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主题：【求助】反相柱的樣品萃取溶液的选择问题？

浏览0 回复6 电梯直达

cjacksonn

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发表于：2010/05/17 17:55:52 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

想請問一下各位專家反相柱的樣品萃取溶液的選擇

萃取溶液與沖堤液的關係應該是怎樣比較好？

可以一樣嗎？
有曾經作過萃取溶液與沖堤液一樣的
每次注入樣品後成份的RT會漂移

謝謝^^

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2010/5/17 21:54:12 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

怎么没懂的啊？？

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有水有渝

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2010/5/17 23:07:36 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这个要根据样品的性质来决定，不知道楼主做的是什么，也不知道用的什么色谱柱，不好分析。保留时间漂移的原因楼主可以在站内搜一下，看看有没有与你的情况相似的。

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2010/5/18 10:38:24 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
这个要根据样品的性质来决定，不知道楼主做的是什么，也不知道用的什么色谱柱，不好分析。保留时间漂移的原因楼主可以在站内搜一下，看看有没有与你的情况相似的。

我是分析8种儿茶素
用YMC-Pack ODS-AM S 4.6×250mm
mobile phase 是
A:100％acetonitrile
B:0.1% phosphoric acid
分析效果不错
但样品萃取用0.1% phosphoric acid 萃
peak retention time（RT）容易漂移
後来改用0.2% phosphoric acid 後retention time比较不会漂移了

因为本人是初学者
所以很想知道为什麽？
进样品的溶液性质会影响分析物与管柱结合吗？
还是有其他的原因
希望各位专家可以指导我一下
谢谢

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有水有渝

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2010/5/18 12:32:54 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

儿茶素具有明显的酚的特性，所以酸性会影响物质的存在形式是分子还离子，而分子与离子在反相色谱柱上的保留能力是不同的。按说用0.1% phosphoric acid 也不会有太大变化才对，因为你的流动相是0.1% phosphoric acid ，不知道你的A、B是什么比例，等度洗脱还是梯度洗脱，可能是你流动相中0.1% phosphoric acid 不足所致。

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2010/5/18 23:55:42 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
儿茶素具有明显的酚的特性，所以酸性会影响物质的存在形式是分子还离子，而分子与离子在反相色谱柱上的保留能力是不同的。按说用0.1% phosphoric acid 也不会有太大变化才对，因为你的流动相是0.1% phosphoric acid ，不知道你的A、B是什么比例，等度洗脱还是梯度洗脱，可能是你流动相中0.1% phosphoric acid 不足所致。

你好
我是使用gradient elution
大约起始 A液 16% B液 84%
第15分鐘 A液 35% B液 65%
第18分鐘 A液 35% B液 65%
第22分鐘 A液 16% B液 84%

如您所说这样是否我该提高phosphoric acid 浓度
再者一般HPLC样品萃取
是否皆以mobile phase为主

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