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主题：【原创】请问为什么电泳时电流不断地增大？

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doris8976
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发表于：2010/05/20 21:15:19 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
正在做一个区带电泳，样品是姜黄素，用乙醇溶的，缓冲溶液是磷酸盐缓冲溶液，pH7.0，浓度20mmol，柱长36cm，电流从13.0微安一直增加，40分钟就增加到了48微安！请有关高手指教。
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sunpengwjh
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2010/5/20 21:56:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一直增加是进样后还是没有进样走基线的时候？
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doris8976
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2010/5/21 8:30:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是进样后电流一直增加啊
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userwzy
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2010/5/21 10:18:48 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
按照常理不应该啊,检查一下你的仪器吧.

你的进样量是多少,是不是进的太多,乙醇导电性不好引起的阿.
为何单纯用乙醇溶解样品,不能加入些缓冲溶液吗?
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sunpengwjh
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2010/5/21 10:36:38 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 doris8976(doris8976) 发表:
正在做一个区带电泳，样品是姜黄素，用乙醇溶的，缓冲溶液是磷酸盐缓冲溶液，pH7.0，浓度20mmol，柱长36cm，电流从13.0微安一直增加，40分钟就增加到了48微安！请有关高手指教。

最好用缓冲溶液溶解样品，然后在试试！
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cpudaxiao
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2010/5/21 16:15:38 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
姜黄素的水溶性怎么样啊？估计不会好。
磷酸盐遇到乙醇会析出的，所以进样量大的话电流会波动很厉害。可以提高样品储存液的浓度和减小进样时间等来实现。
实在不行换根柱子试一下
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fanchuangang
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2010/5/24 9:12:09 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
配置样品要用缓冲液，要不然电流变化就是比较大
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xjy0402
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2010/5/24 13:03:21 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1.首先我觉得当电压增加到一定程度时，焦耳热不易散发，使缓冲溶液粘度降低，迁移率增加，姜黄素类化合物的分离度下降。因此要选个理想的电压。
2.其次 缓冲溶液的酸碱度直接影响被测物质的带电性，从而影响其分离度。由于姜黄素类化合物含有酚羟基，其酸性较弱。在pH>9．00时，酚羟基才开始解离；在pH=9．60时，姜黄素类化合物能够基线分离；在pH≥10．0时，姜黄素类化合物迁移时间延长，且峰形变差；所以缓冲溶液的pH值确定在9．60。
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doris8976
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2010/5/25 17:15:25 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习了！换了根柱子，现在电流已经稳定。多谢各位！
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baiyunshan
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2010/5/28 23:34:15 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我也想问一个问题，我电泳的时候电流也是要增大，但是到一定时间后它又平稳了，请问这是什么原因造成的？我的缓冲液是硼砂，浓度为15mM
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2010/5/31 16:24:31 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有可能是管壁的硅羟基在您所用的缓冲溶液中还没有达到一个平稳得状态！
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