主题:【求助】HPLC-MS/MS基础知识的补充追问(想到就问)

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wzx0923
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3 标样重复进样测定N次,啥意思?感觉跟平行样的测定不一样吧?
  重复进样是指一根针多次吸那一甁溶液?如果那甁溶液很是均一,这样重复吸意义大吗?

4 HPLC-ESI-MS/MS(API4000)
待测物的母离子,比如说[M+NH4]+;对该待测物标准品进行母离子和子离子全扫描,怎么就能确定它的母离子就是[M+NH4]+而不是其它离子呢?怎么确定某几个子离子就是来源于该母离子的?毕竟标准品溶液中不止一种物质。质谱图上除了质荷比和强度外,还有什么呢?还存在物质的关联信息吗?
推荐答案:netsking回复于2010/05/30

这个操作是确定仪器的系统误差, 同一标样重复进样比如100次, 来确定第一针与最后一针之间的保留时间及峰面积的差异, 从而确定仪器的系统误差.

4 HPLC-ESI-MS/MS(API4000)
待测物的母离子,比如说[M+NH4]+;对该待测物标准品进行母离子和子离子全扫描,怎么就能确定它的母离子就是[M+NH4]+而不是其它离子呢?怎么确定某几个子离子就是来源于该母离子的?毕竟标准品溶液中不止一种物质。质谱图上除了质荷比和强度外,还有什么呢?还存在物质的关联信息吗?


要做MSMS应该知道待测物的一些信息. 如果一点都没有的, 就有点难了. 但NH4是加18, 如果在M-18处有峰,就可以判断这是加了NH4; 还有流动相中的如果用了NH4Ac, 这种可能性更大.

你说的标准品是指的什么标准品, 是Tune的标准品吗? 如果是就应该没有用NH4Ac, 用注射器直接进样, 这时加NH4, 可能是MS系统被NH4Ac污染了. 应该好好清洗一下MS了.
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netsking
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原文由 wzx0923(wzx0923) 发表:
3 标样重复进样测定N次,啥意思?感觉跟平行样的测定不一样吧?
  重复进样是指一根针多次吸那一甁溶液?如果那甁溶液很是均一,这样重复吸意义大吗?

这个操作是确定仪器的系统误差, 同一标样重复进样比如100次, 来确定第一针与最后一针之间的保留时间及峰面积的差异, 从而确定仪器的系统误差.

4 HPLC-ESI-MS/MS(API4000)
待测物的母离子,比如说[M+NH4]+;对该待测物标准品进行母离子和子离子全扫描,怎么就能确定它的母离子就是[M+NH4]+而不是其它离子呢?怎么确定某几个子离子就是来源于该母离子的?毕竟标准品溶液中不止一种物质。质谱图上除了质荷比和强度外,还有什么呢?还存在物质的关联信息吗?


要做MSMS应该知道待测物的一些信息. 如果一点都没有的, 就有点难了. 但NH4是加18, 如果在M-18处有峰,就可以判断这是加了NH4; 还有流动相中的如果用了NH4Ac, 这种可能性更大.

你说的标准品是指的什么标准品, 是Tune的标准品吗? 如果是就应该没有用NH4Ac, 用注射器直接进样, 这时加NH4, 可能是MS系统被NH4Ac污染了. 应该好好清洗一下MS了.
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tianhaikuo
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wzx0923
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3 标样重复进样测定N次,啥意思?感觉跟平行样的测定不一样吧?
  重复进样是指一根针多次吸那一甁溶液?如果那甁溶液很是均一,这样重复吸意义大吗?

这个操作是确定仪器的系统误差, 同一标样重复进样比如100次, 来确定第一针与最后一针之间的保留时间及峰面积的差异, 从而确定仪器的系统误差.

4 HPLC-ESI-MS/MS(API4000)
待测物的母离子,比如说[M+NH4]+;对该待测物标准品进行母离子和子离子全扫描,怎么就能确定它的母离子就是[M+NH4]+而不是其它离子呢?怎么确定某几个子离子就是来源于该母离子的?毕竟标准品溶液中不止一种物质。质谱图上除了质荷比和强度外,还有什么呢?还存在物质的关联信息吗?


要做MSMS应该知道待测物的一些信息. 如果一点都没有的, 就有点难了. 但NH4是加18, 如果在M-18处有峰,就可以判断这是加了NH4; 还有流动相中的如果用了NH4Ac, 这种可能性更大.

你说的标准品是指的什么标准品, 是Tune的标准品吗? 如果是就应该没有用NH4Ac, 用注射器直接进样, 这时加NH4, 可能是MS系统被NH4Ac污染了. 应该好好清洗一下MS了.


谢谢指点啊~
Tune是什么?我不懂。 是阿维菌素和伊维菌素标准品。物质的分子量是知道的,但是形成母离子后只知道质荷比吧,电荷数是1或是2或是其它这个不能确定吧?就算知道了分子量增加了多少,也不太好确定是增加了什么离子或基团吧? 得结合其它信息?我流动相中是加了铵根离子的。

对标准品进行一级质谱全扫描,标准物质的母离子应该只有很有限的几个吧,可我的这个图,乱七八糟的,什么东西不知道。
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2010/5/31 0:04:23 Last edit by wzx0923
netsking
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从你给出的图谱中,主要的峰是654和880? 很可能是加了NH4,因氮原则.另外在600~650之间有许多.5的峰,它们会不会你的标准品形成多离子化后产生的?
yuanyanjuan
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我觉得可以先把电压降低一点打一针看下,还有就是做主峰的二级质谱,看下那些小峰是不是主峰经过碰撞后产生的。
lhz0702
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阿维菌素类母离子一般是加铵或加钠离子,加氢离子一般观察不到,如果在流动相中加入NH4AC,加铵离子丰度会很高。
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