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气相色谱（GC）

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主题：【求助】GC样品，检测问题？

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yfdihdx

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发表于：2010/06/05 22:04:20 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

生物样品（比如粪便中短链脂肪酸的检测）的气相色谱方法学验证应怎么做，请各位指教！谢谢！

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2010/6/6 9:32:35 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

短链脂肪酸的检测楼主可以在版内搜索，有这方面的帖子的，不过你的这个样品前处理估计会比较繁琐，样品太特殊了。

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yfdihdx

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2010/6/7 0:01:35 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 阿宝(lpr20) 发表:
短链脂肪酸的检测楼主可以在版内搜索，有这方面的帖子的，不过你的这个样品前处理估计会比较繁琐，样品太特殊了。

感谢回答，我想知道标曲，日内精密度和日间精密度及重现性都是用标准品做吗？

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2010/6/7 9:54:34 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

怎么没大侠知道？

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chenyqswu

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2010/6/9 11:54:37 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 yfdihdx(yfdihdx) 发表:
怎么没大侠知道？

短链脂肪酸（SCFA，short-chain fatty acid）测定

气相色谱法（GC）^[35]

（1）标准曲线制作：按表4-3配置不同浓度梯度的乙酸、丙酸和丁酸（也可包括戊酸，己酸，庚酸）标准溶液后进气相色谱分析。用带有火焰离子化检测器和自动进样器的岛津GC2010仪器进行气相色谱分析。分析柱为30m×0.53mm×0.50µm规格的石英毛细管柱（大连，中汇达）游离脂肪酸分析柱（FFAP，free fatty acid phase），载气为氮气，流速为14.4ml/min；测定采用程序升温，初温100℃，保持0.5 min后，以8℃/min的升温速度使最终柱温达到150℃，最终保持1.5min。采用不分流测定方式。进样衬管中置入的玻璃棉，防止样品中颗粒污染物堵塞毛细管柱；监测器（火焰离子化检测器FID）和进样口温度分别为240℃和200℃；氢气、空气和氮气的流速分别为30、300和20 ml/min；进样量为1µL，每个样品运行时间是8.25min。数据处理在HP ChemStation气相色谱工作站中进行。最后以脂肪酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得标准曲线，见图4-1，4-1和4-3。乙酸、丙酸和丁酸的标准混合物的气相色谱分析图见图4-4，其中从左到右分别代表乙酸、丙酸和丁酸标准品在气象色谱分析中的滞留时间。

（3）小鼠粪便样品测定：取0.6g（精确至0.001g）冻结的粪便样品，解冻后悬浮于3ml色谱纯水中，激烈搅拌使粪便均匀分散后静置5min。向粪便匀浆中滴加5mol/L盐酸使其pH降低到2～3。在室温放置10min并间歇摇动。随后将粪便匀浆转移至离心管中，在5000r/min下离心20min。取上清液，并混合一定量的2-乙基丁酸内标溶液（内标的最终浓度保持在1mmol左右）。按照标准溶液分析条件上气相色谱分析。并根据标准曲线计算样品中脂肪酸的含量。

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2010/6/9 12:22:38 Last edit by chenyqswu