主题:【求助】分子量分布测试,老问题,不能理解,大家帮忙一下

浏览0 回复3 电梯直达
flying_23
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
测试的样品为生物反应器的上清液,成分很多,主要为蛋白质,多糖以及腐植酸,主要想看上清液的分子量分布
在文献中查到
UV detector of the GPC mainly targeted to protein detection in SMP and refractive index detector of the GPC mainly targeted to polysaccharide detection in SMP。
其中SMP的定义就为上清液
因此试验采用若用示差检测器的话,测得是糖的分布;用紫外检测器,测得是蛋白质分布

/////////////////////////////
在昨天的发帖中“采用液相色谱测定分子量分布时,遇到的问题”

有个回帖提到采用液相色谱做分子量分布,应该用示差检测器........,
还有个回帖提到蛋白质UV有吸收,糖UV没有吸收?
/////////////////////////////

实在不明白了,关系到论文的内容,请大家帮忙,到底该怎么测分子量分布,试验室就紫外和示差两种检测器
为您推荐
您可能想找: 凝胶渗透色谱(GPC)/凝胶色谱 询底价
专属顾问快速对接
立即提交
caoxianfeng
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
其实楼主可以两种检测器都试一下,看看哪个检测器检测结果更合理。实验实验,实验结果不是最能说明问题吗?据我所知,糖UV没有吸收,但是我没测过,你可以在紫外光谱仪上先测一下吸收。 示差检测器是通用型检测器,只是灵敏度较低;紫外检测器灵敏度高,但对于没有紫外吸收的物质无能为力。
tigertooth
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
蛋白质应该是UV和RI都有信号,多糖一般RI有信号UV无信号。但你要确定你的多糖到底是普通的多糖还是糖蛋白,因为我遇到很多人,把糖蛋白当成多糖,糖蛋白也是UV和RI都有信号的。
小不董
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
你需要测定分子量分布,用GPC是对的,关键在于选择合适的柱子,最好你要知道你的样品的分子量在什么范围。用水性柱还是有机相柱子。
蛋白质容易变性,其实不好做,用紫外检测器是很好的方法。多糖还是用IR比较好。有点想知道的是,你的GPC是在HPLC上做的还是什么?GPC上如果两种检测器都有,就比较好,但由于两者都是浓度检测器,很少人用这两个检测器联用的。
如果是两台仪器,那用同样的柱子和同样的流动相也可以做,一般IR有吸收,紫外没吸收的就是多糖,如果两个谱图可以放在一起,就比较好分别分析多糖和蛋白的分布了。
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴