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主题：【分享】高效液相色谱检测乳制品中的乳铁蛋白含量

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雾非雾

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发表于：2010/06/14 12:27:46 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

借助高效液相色谱法测定乳制品中乳铁蛋白。方法：先通过额外加入的二价铁离子使乳铁蛋白的构型更利于沉淀。然后用体积分数60% 乙醇溶液沉淀蛋白除去糖分，再用醋酸盐缓冲液提取乳铁蛋白并分离掉酪蛋白，最后用高效液相色谱检测，采用LiChrosorb RP-C18 色谱柱，在质量浓度0.1g/100mL 的三氟乙酸溶液协助下，甲醇与水线性梯度洗脱。结果：乳铁蛋白的线性范围是0.4～2mg/mL(R2=0.9980)，平均回收率95.4%。结论：此方法可以用于乳制品中乳铁蛋白的测定。

附件：

高效液相色谱检测乳制品中的乳铁蛋白含量.pdf

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2010/6/14 12:28:58 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

乳铁蛋白广泛分布于哺乳动物乳汁和其他多种组织及其分泌液中(包括泪液、精液、胆汁、滑膜液等内、外分泌液和嗜中性粒细胞)，人乳中乳铁蛋白浓度约为1.0-3.2mg/ml，是牛乳中的10倍（牛乳中含量为0.02-0.35mg/ml），占普通母乳总蛋白的20%，在泌乳期间，乳铁蛋白含量随着泌乳时间的不同而发生变化，如人初乳中乳铁蛋白可达6-14mg/ml，常乳期降至1mg/ml。

　　乳铁蛋白及其蛋白降解产物—乳铁蛋白肽具有广泛的生物学活性，包括广谱抗菌作用、消炎、抑制肿瘤细胞生长及调节机体免疫反应等，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品、化妆品添加剂，如美国食品药品管理局早巳允许乳铁蛋白作为食品添加剂用于运动、功能性食品。

该帖子作者被版主 binglang1985加 3积分， 2经验，加分理由：感谢补充

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2010/6/15 6:11:13 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

想问大哥，乙醇体积分数的多少影响沉淀蛋白的效果吗？在肌醇检测中也用乙醇沉淀

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2010/6/15 9:43:26 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 天天洗碗(binglang1985) 发表:
想问大哥，乙醇体积分数的多少影响沉淀蛋白的效果吗？在肌醇检测中也用乙醇沉淀

不好意思，我没做过乳制品检测，这个问题问zhouyuhu专家，他是做乳品检测的。

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雾非雾

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2010/6/15 9:44:17 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

RP-HPLC 法对乳制品中主要牛奶蛋白的分离及定量测定

建立一种基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)的分析方法，对牛奶及其乳制品进行定量分析。此方法可一次分离牛奶及乳制品中的7 种主要蛋白成分(κ-CN、αs 2-CN、αs1-CN、β-CN、α-La、β-LgB、β-LgA)，解决了加工后乳制品中变性蛋白定量不准确的问题和κ-CN、αs2-CN 以及乳清蛋白中α-La、β-LgB 和β-LgA 难以分离的困难。各组分分离度均大于1，达到基线分离，回收率达88.9%～97.1%，相对标准偏差为0.8%～5.1%。该方法不需对样品进行离心，在测定清蛋白组分时，也不需提前去除优势蛋白酪蛋白，与传统的检测方法相比，具有准确、灵敏和快速等特点，可用于牛奶及其乳制品的质量控制和定量检测。

附件：

RP-HPLC 法对乳制品中主要牛奶蛋白的分离及定量测定.pdf

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