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液相色谱（LC）

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主题：【求助】请帮忙推荐一下检测戊糖的色谱柱

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leefei1042

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发表于：2010/06/24 09:03:17 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

目前有一个戊糖包括5个结构相似的有关物质，1、用什么柱子和流动相可行呢？（流动相最好没有缓冲盐）2、硅胶键合的氨基柱与做糖分析的树脂键合饿硅胶柱区别大吗？3、可否推荐与戴安的阴离子交换柱CarboPac PA1分离效果相当的色谱柱？谢谢！静候高见！

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2010/6/24 10:17:44 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱子写错了，应为戴安的CarboPac PA1

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有水有渝

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2010/6/25 19:07:54 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

高效液相色谱仪测定糖类的实验条件
1.前处理和标准物的选择

（1＝葡萄糖；2＝果糖；3＝半乳糖；4＝乳糖；5＝蔗糖；6＝麦芽糖；7＝棉子糖）

标准物要选择得有代表性并和待测组分性质接近，用内标法选用的标准物不能同样品中的其它组分发生反应。

2. 色谱系统

(1) 反相色谱法: 常于分离一些如麦芽糊精（乙糖至一些寡糖）、部分水解的直链淀粉、硫代羧酸葡萄糖苷的氨基磺酸盐、葡糖苷酸和硫酸酯复合物等。反相柱中的水流动相可在不加有机溶剂的条件下分离一些寡糖化合物，这些糖类在有机溶剂中的溶解度一般都是很小的。反相色谱法虽也用于分离单糖，担分离单糖的效果不太理想。

(2) 一般的氨基烷柱液相色谱法：常用于分离糖蛋白的化学或酶促水解产物，如含葡萄糖和N-乙酰氨基葡糖的低聚糖。此法常用乙腈和水的混合溶液作洗脱剂，根据试样组成的特点，溶剂中的含水量常为10－40％（V/V）。

(3) 高效离交色谱法：此法常用于分析单糖及其衍生物，流动相为水，柱温较高，通常可达到80－90℃。用于糖类分析的离交色谱柱价格昂贵，分析较耗时。

(4) 多胺修饰的硅胶柱色谱法：可用于分离二糖（如蔗糖、麦芽糖、乳糖），但不能用于分离单糖（如葡糖或果糖），流动相也常为乙腈的水溶液。

(5) 高效凝胶渗透色谱法：是根据糖分子的大小逐步洗脱糖类化合物的，多用于寡糖和多糖，流动相多为中性盐的水溶液。