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主题：【已应助】【求助】用质谱对血清中的药物成分定量，内标只能溶于甲醇，加到血清中分布不均！

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majing_930

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发表于：2010/06/24 23:26:07 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

用质谱测定血清中的药物浓度，需要加入20ul的内标，但内标不溶于水，溶于甲醇，所以内标加进去后可能会有蛋白沉淀，这样会不会导致内标分布不均匀？并且，离心之后还是存在这样的现象。
这样的现象主要是在同一个样品连续进样后，发现内标的响应相差悬殊才发现的。各位大侠有没有发现类似的问题？

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2010/6/25 19:35:34 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

首先是信号相差悬殊，楼主可以看下纯标重复进样，看看质谱响应的稳定性。
其次，20ul内标直接加进去应该会有一些沉淀，但离心之后再稍加混匀，应该不存在分布不均的情况。
再次，实在感觉有影响的话，可以把甲醇的比例降低，或者说配好纯甲醇溶解的内标溶液后，用含一定比例水相的有机溶剂进行稀释，以此降低甲醇的影响。
另外，问下，楼主的样品不要经过前处理，直接加了内标后上样？

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majing_930

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2010/6/25 21:46:23 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 小猪飞飞(zpf20031212) 发表:
首先是信号相差悬殊，楼主可以看下纯标重复进样，看看质谱响应的稳定性。
其次，20ul内标直接加进去应该会有一些沉淀，但离心之后再稍加混匀，应该不存在分布不均的情况。
再次，实在感觉有影响的话，可以把甲醇的比例降低，或者说配好纯甲醇溶解的内标溶液后，用含一定比例水相的有机溶剂进行稀释，以此降低甲醇的影响。
另外，问下，楼主的样品不要经过前处理，直接加了内标后上样？

非常非常感谢前辈的热情帮助！
因为我的样品是血清，所以必须要沉淀蛋白之后才能进样分析的啊。
请问前辈，还有什么其他的原因能导致我这种现象的发生吗？有没有可能是流动相的梯度设置的不合理造成的，或者是前处理时致使一些成分结合或者相互反应造成的呢？
由于我是刚刚接触这部分工作不久，之前的基础也比较少，所以遇到了问题很是挠头啊，谢谢您帮我分析的原因以及建议的改进方法！

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