主题:【求助】菌种的保存

浏览0 回复11 电梯直达
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大家好,我是微生物的新手,我知道菌种的保存方法有很多种,然后我觉得液体石蜡覆盖的保藏法比较适合我公司使用,方法如下:液体石蜡覆盖保藏法:是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
          有点不知道的是,斜面培养物的试管放在培养箱培养一段时间后,拿出来是把石蜡什么覆盖在试管上呢,是把试管上端的棉花上覆盖石蜡还是怎么弄呢?谢谢了!
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xiaoqing5182001
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      将液体石蜡分装加棉塞,用牛皮纸包好,0.1MPa灭菌30分钟取出,置40℃恒温箱蒸发水分,经无菌检查后备用。

      无菌条件下将灭菌的液体石蜡注入刚培养好的斜面培养物上,液面高出斜面顶部1厘米左右,使菌体与空气隔绝。

      将注入石蜡油的菌种斜面直立存放于低温(4℃-15℃)干燥处,保藏时间为2-10年不等。

      恢复培养时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次。
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消咳喘
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微生物的实验技术最好还是由经验丰富的老师现场教比较好,微生物学习班现在也很多的。
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原文由 消咳喘(rogersw) 发表:
微生物的实验技术最好还是由经验丰富的老师现场教比较好,微生物学习班现在也很多的。


我是南京的,请问你知道南京是什么地方有呢,谢谢了
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原文由 xiaoqing5182001(xiaoqing5182001) 发表:

      将液体石蜡分装加棉塞,用牛皮纸包好,0.1MPa灭菌30分钟取出,置40℃恒温箱蒸发水分,经无菌检查后备用。

      无菌条件下将灭菌的液体石蜡注入刚培养好的斜面培养物上,液面高出斜面顶部1厘米左右,使菌体与空气隔绝。

      将注入石蜡油的菌种斜面直立存放于低温(4℃-15℃)干燥处,保藏时间为2-10年不等。

      恢复培养时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次。


这里就是直接把液体石蜡倒入培养好的试管里吗?那恢复培养时,那么多的石蜡在里面怎么挑取呢?谢谢了
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原文由 280520303(280520303) 发表:
原文由 xiaoqing5182001(xiaoqing5182001) 发表:

      将液体石蜡分装加棉塞,用牛皮纸包好,0.1MPa灭菌30分钟取出,置40℃恒温箱蒸发水分,经无菌检查后备用。

      无菌条件下将灭菌的液体石蜡注入刚培养好的斜面培养物上,液面高出斜面顶部1厘米左右,使菌体与空气隔绝。

      将注入石蜡油的菌种斜面直立存放于低温(4℃-15℃)干燥处,保藏时间为2-10年不等。

      恢复培养时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次。


这里就是直接把液体石蜡倒入培养好的试管里吗?那恢复培养时,那么多的石蜡在里面怎么挑取呢?谢谢了


呵呵,不好意思了,经过我反复的看,我终于看明白了,就是直接倒入试管内斜面顶部1里面左右就够了,呵呵,谢谢了。
liuying2010
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我也曾用这种方法保藏过菌种,但是保存了两个月后拿出来培养后,发现菌种都死掉了。不知道是什么原因,我的温度各方面都比较正规的
蓝鹰之舞
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斜面保存菌种一般每个月都必须重新传代活化,两个月不管大部分死翘翘,加了液体石蜡也只能放两个月
要想保存久一点可以沙土保存(半年左右)
再久一点就配冻存液(甘油牛奶那些),-20能有一年,-86能存两年
再久就只有冻干粉冻存了
该帖子作者被版主 rogersw2积分, 2经验,加分理由:奖励应助
lj-1987
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谢谢了不过看了还是不怎么明白要是有视频操作就好了
liuliuhui
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想提醒楼主及其他同仁们,从液体石蜡覆盖层下移种时,接种针在火焰上灼烧是菌体会随着液蜡四溅,如果培养物事病原性菌时,应予注意,小心操作。
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